HIV共受容体(ケモカイン受容体)の発現及び機能のコントロール:分子生物学的解析

HIV 辅助受体（趋化因子受体）表达和功能的控制：分子生物学分析

基本信息

批准号：
15019077
负责人：
森内浩幸
金额：
$ 3.33万
依托单位：
Nagasaki University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
2003
资助国家：
日本
起止时间：
2003 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-15019077/
关键词：
HIV AIDS CCR5 プロモーター概日リズム EBウイルス紫根 α-フェトプロテイン

项目摘要

(1)CCR5の発現が朝低く夜に高くなる概日リズムを示すことを、リアルタイムRT-PCRを用いてmRNAのレベルで、そして定量的フローサイトメトリーを用いて細胞表面発現のレベルで示した。この機序として、概日リズムの影響を受ける転写因子であるDBPが関与する可能性を、(1)DBPが末梢血リンパ球においても発現し、細胞核抽出液を用いたゲル・シフト実験で朝に低く夜に高い発現パターンを示すこと、(2)CCR5プモーター領城にDBPが結合することをゲル・シフト実験で示したこと、(3)DBPがCCR5プロモーターの活性を亢進させることをトランスフェクション実験によって示したこと、そして(4)CCR5プロモーター上のDBP結合部位の変異導入によってこのような活性化作用が消失することによって示した。(2)EBウイルスの急性感染(伝染性単核症)に際してリンパ球が活性化されしかもTh1に強くシフトされることから、Th1のマーカーともされるCCR5の発現とこれを用いて細胞に侵入するR5-HIV-1の感染効率を調べたところ、(1)伝染性単核症急性期においでCCR5の発現が高まり回復期にはコントロールのレベルに戻ること、そして(2)急性期と回復期にそれぞれ採取保存していたリンパ球を用いてR5-HIV-1の感染実験を行ったところ、急性期のリンパ球は特に細胞に刺激をさらに加えることなくとも感染を効果的にサポートすることを明らかにした。(3)漢方薬としても用いられる紫根の主成分シコニンがCCR5の発現をプロモーターのレベルで抑制することを示した。(4)胎児・新生児および妊婦の血清に大量に含まれるα-フェトプロテインがCCR5の発現を抑制することを示した。

（1）我们证明了一种昼夜节律，其中ccr5表达在早晨较低，而晚上则使用实时RT-PCR和使用定量流式细胞仪在细胞表达水平下在mRNA水平上高。 This mechanism shows that DBP, a transcription factor influenced by circadian rhythm, may be involved, by (1) DBP is also expressed in peripheral blood lymphocytes, and gel shift experiments using cell nuclear extracts show a low expression pattern in the morning and high night, (2) gel shift experiments show that DBP binds to CCR5 Pumatour castle, (3) transfection experiments show that DBP增强CCR5启动子的活性，以及（4）这种激活作用的诱变。 (2) Lymphocytes are activated during acute infection with EB virus (infectious mononucleosis), and are strongly shifted to Th1, so we investigated the expression of CCR5, which is considered a marker of Th1, and the infection efficiency of R5-HIV-1, which invades cells, and the infectious efficiency of R5-HIV-1, which invades cells, and (1) CCR5 expression increases during the acute phase of感染性单核细胞增多症，在恢复阶段恢复到对照水平，以及（2）使用收集并存储在恢复阶段的淋巴细胞进行R5-HIV-1感染实验，并发现急性相中的淋巴细胞在急性相中有效地支持感染而无需进一步刺激细胞。（3）我们已经表明，西科宁是紫根的主要成分，也被用作草药医学，可抑制启动子水平的CCR5的表达。（4）我们表明，在胎儿，新生儿和孕妇的血清中大量发现的α-毒素抑制了CCR5的表达。