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メリステム形成・維持に必須な細胞接着関連遺伝子の探索と機能解明

分生组织形成和维持所必需的细胞粘附相关基因的搜索和功能阐明

基本信息

批准号：
15031203
负责人：
佐藤忍
金额：
$ 3.84万
依托单位：
University of Tsukuba
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
2003
资助国家：
日本
起止时间：
2003 至 2004
项目状态：
已结题

项目摘要

ペクチンのアラビナン鎖の伸長が著しく抑制されている変異体nolac-H14において、原因遺伝子として新規膜タンパク質をコードするLARA1 (long arabinan related protein 1)が同定され、この遺伝子は茎頂および側根原基で発現(根端では無し)することがわかった。この遺伝子の発現抑制をRNAiによって行ったところ、ノーザンブロッティングにより検出できないレベルに発現は抑制され、nolac-H14のようなルーズな細胞接着性を示した。過剰量のアラビノースをnolac-H14の培地に添加したところ、変異形質が回復したことから、LARA1はアラビノース転移酵素へUDP-アラビノースを供給する輸送体の一部ではないかと考えられた。また今回、アクティベーションタギングによる過剰発現系を用いた細胞接着変異体の作成を行った。その結果、現在までに7株の変異体株を作出し、そのうちのshoolac1では、葉の表皮の細胞間に大きな裂け目が生じるとともに、葉肉細胞等にも形態と接着性の異常が生じている様子が観察された。shoolac1のゲノムより、TAIL-PCRにより約450bpのT-DNA近傍配列を得た。この配列のアミノ酸配列は、シロイヌナズナの遺伝子と約60%の相同性を示した。そこで、この遺伝子を以後AtSHOOLAC1と呼び、shoolac1の原因遺伝子の候補とした。AtSHOOLAC1タンパク質は小胞体、ゴルジ体に移行するシグナルをもっており、一回膜貫通型の典型的な糖転移酵素の構造をしていた。また、細胞壁合成関連遺伝子によって構成されていると予想されるGlycosyltransferase-47ファミリーの独立したクラスターに属していた。AtSHOOLAC1とアミノ酸配列で約80%の相同性があるタバコBY-2培養細胞ESTも存在していた。

Lara 1 (long arabinan-related protein 1) is the same as lara 1 (long arabinan-related protein 1), which is the same as lara 1 (long arabinan-related protein 1), which is the same as lara 1 (long arabinan-related protein 1). The expression of these genes is inhibited by RNAi, and the expression of these genes is inhibited by nolac-H14. A part of the transport medium supplied by LARA 1 has been added to the culture medium of nolac-H14, and a part of the transport medium supplied by LARA 1 has been added to the culture medium of nolac-H14. In the present case, the cells are used to create the new gene. The results showed that 7 allogeneic plants were produced, and all the shoolac 1 plants were observed. The morphological and adhesive abnormalities of the epidermal cells and mesophyll cells were observed. Shoolac 1 gene sequence, TAIL-PCR gene sequence about 450 bp and T-DNA near alignment were obtained. The alignment of these molecules is about 60% identical to each other. AtSHOOLAC 1, Shoolac 1, Shoolac 1, Shoolac 1 AtSHOLAC 1 is a typical sugar transfer enzyme structure of the type that contains small cells, small cells, and small cells. In addition, cell wall synthesis is associated with the formation of glycosyltransferase-47, which is thought to be independent of cell wall synthesis. AtSHOOLAC 1 has about 80% identity to the acid sequence.