高等植物の形態形成における細胞接着機構の解析

高等植物形态发生中的细胞粘附机制分析

• 批准号: 11163204
• 负责人: 佐藤 忍
• 金额: $ 1.73万
• 依托单位: University of Tsukuba
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
• 财政年份: 1999
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1999 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-11163204/
• 关键词: ペクチン; アルビノース; 細胞接着; タバコ; カルス; 突然変異

本研究では、Nicotiana属中で最小のゲノムを持つN.plumbaginifoliaの半数体植物を材料として用い、器官形成能力を失うと同時に細胞の接着性に異常の生じたミュータントの作出と解析を行うことで、ペクチン多糖の構造と機能の理解と細胞接着関連遺伝子の単離をめざした。半数体Nicotiana plumbaginifoliaの葉切片に、ハイグロマイシン(またはカナマイシン)耐性マーカーを有するT-DNAを導入したところ、6.7%のリーフディスクに不定芽形成能力を消失したペースト状のカルスが生じた。そのうち、1株(nolac-H14)では、ペクチンが中葉と細胞壁で激減していた。また、nolac-H14では、ヘミセルロースが主に抽出されてくる4M KOH画分において、アラビノース、ガラクトース、ガラクツロン酸というペクチンを構成する成分が激減し、一方、変異株の培養培地中に、ペクチンを構成する糖成分が多量に検出されたことから、変異株では、本来細胞壁と結合するべきペクチンが培地中にリークしている可能性が示唆された。次に、ペクチンを精製しメチル化分析を行ったところ、正常株ではヘミセルロースと挙動を同じくする(細胞壁に強く結合する)ペクチンが長いアラビナン領域を含んでいるのに対し、nolac-H14では、アラビナンが欠失していることが示された。変異株(6株)からTAIL-PCR法によりT-DNAの近傍のゲノムDNA断片(22個)の単離と部分シークエンスの決定を行ったところ、細胞壁の構成タンパク質であるエクステンシンに相同性の高い遺伝子などが見出された。また、正常株において、この断片を含む遺伝子が発現している事が確認された。

In this study, Nicotiana is the smallest plant material in the genus N.plumbaginifolia. In this study, half of the plant materials are used, and the ability of organ formation is impaired. At the same time, the cells are not able to do the analysis, and the polysaccharides machine can understand that the cells can then be isolated. Half of the Nicotiana plumbaginifolia samples were sliced, tested and tolerated. The ability to form adventitious buds disappeared in the presence of T-DNA. One strain (nolac-H14), one strain (Lactobacillus), and one strain (Lactobacillus) in the cell wall. The main products were extracted from 4m KOH in order to make sure that the ingredients were stimulated, one side, the plant was cultured, the sugar components were increased, and the sugar components were extracted. Originally, the combination of the cell wall and the cell wall indicates that the possibility of the cell wall is instigated. In the field of chemical analysis, there is an indication of the loss of the cell wall, the cell wall and the cell wall. The TAIL-PCR method was used to detect the T-DNA near the DNA fragments (22). The partial DNA fragments were isolated and the cell walls were determined to be isolated. The spores, the normal plants, and the fragments contain the spores, so that you can make sure that you are in trouble.

项目成果

H.Iwai: "Production of non-organogenic and loosely attached callus in leaf disk cultures of haploid Nicotiana plumbaginifolia by ^<14>Nion beam irradiation."Plant Biotechnology. 16. 307-309 (1999)

H.Iwai：“通过^ 14 N离子束照射在单倍体烟草叶盘培养物中产生非器官性和松散附着的愈伤组织。”植物生物技术。

H.Iwai: "High levels of non-methylesterified pectins and low levels of peripherally located pectins in loosely attached non-embryogenic callus of carrot."Plant Cell Report. 18. 561-566 (1999)

H.Iwai：“在松散附着的胡萝卜非胚性愈伤组织中，非甲基酯化果胶含量高，外围果胶含量低。”植物细胞报告。