一過性高尿素状態は蛋白カルバミル化として記憶され生体毒性を示す

瞬时高尿素状态被记忆为蛋白质氨甲酰化并表现出生物毒性。

基本信息

批准号：
15K19454
负责人：
下村明弘
金额：
$ 2.5万
依托单位：
Osaka University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
财政年份：
2015
资助国家：
日本
起止时间：
2015-04-01 至 2016-03-31
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-15K19454/
关键词：
カルバミル化尿素血管石灰化 uremic memory 腎不全

项目摘要

我々は平成27年度に予定していた計画のうち、下記のことを明らかにした。応募の段階では尿素のコントロールをスターチとしていたが、スターチはカロリー負荷となるため適さないとその後判断し、セルロースへ変更して実際の研究を行った。予備検討では、uremic memory保持期間と考えられる10%尿素負荷中止1週後にアデニン負荷を開始したラットでは、セルロース事前投与後アデニンを負荷したラットより血管石灰化に増悪傾向が認められる事を確認していたが、実験に供した動物数が少なく、統計学的有意差を見出すには至っていなかった。そこで、まず本研究では動物数を増やして再検討したところ、統計学的有意差を見出すことができ、真実であることを確認した。次に、抗カルバミル化蛋白抗体を用いたWestern blotおよび免疫組織化学法により、4週間の10%尿素混餌投与で血管の構成蛋白質がカルバミル化されていることを明らかにした。次に継時的サンプリングにより、10%尿素混餌投与終了1週後では血管構成蛋白質のカルバミル化が保持されているが、8週後では消失しており、セルロース事前投与群と差が無いことを確認した。そのため、カルバミル化が消失した尿素負荷終了8週後およびセルロース事前投与終了8週後よりアデニンを負荷して、その後に得られる血管石灰化の程度をカルバミル化が保持されている尿素負荷終了1週後からアデニンを負荷した場合と比較した。その結果、尿素負荷1週後からアデニンを負荷した際に認められていた血管石灰化の増悪は消失しており、その程度はセルロース事前投与群と同等であった。このことは、カルバミル化がuremic memoryとして作用し、アデニン誘導性腎不全ラットの血管石灰化を増悪させている可能性を示唆している。

我们已经揭示了计划于2015财年计划的计划的以下计划。在申请阶段，尿素被控制为淀粉，但是由于淀粉受到卡路里负荷的约束，因此确定它不合适，因此我们将其更改为纤维素进行实际研究。初步研究证实，在停止10％尿素荷载后一周开始腺嘌呤负荷的大鼠中，这被认为是尿毒症记忆的保留期，血管钙化的趋势比在纤维素预先服用后接受腺嘌呤的大鼠比大鼠更糟，但在纤维素中使用的动物数量很大，并且在统计上很大。因此，在这项研究中，我们首先重新检查了动物的数量，并发现统计学上的显着差异，证实它们是真实的。接下来，使用抗玉米粉蛋白抗体的蛋白质印迹和免疫组织化学表明，在10％尿素混合食品给药后，血管组成蛋白被甲基化4周。接下来，通过瞬时抽样，可以证实，在10％尿素混合食品给药的结束后一周保留了血管成分蛋白的卡氨基化，但在8周后消失，并且与预先管理的纤维素相比没有差异。因此，从尿素载荷结束后的8周中施用腺嘌呤，甲氨基化消失了，从纤维素预进给糖的末期结束后的第8周，以及在此之后获得的血管钙化程度与腺嘌呤进行了比较，从尿素载荷结束后的1周进行了比较。结果，在消除尿素加载后一周施用腺嘌呤时观察到的血管钙化加剧，该度与纤维素预先施用组的程度相当。这表明卡氨基化可能充当腺嘌呤诱导的肾衰竭大鼠的尿毒症记忆和加剧血管钙化。