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インクレチン産生細胞の形成機序の解明

阐明肠降血糖素产生细胞的形成机制

基本信息

批准号：
16K19535
负责人：
渋江公尊
金额：
$ 2.5万
依托单位：
Kyoto University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
财政年份：
2016
资助国家：
日本
起止时间：
2016-04-01 至 2017-03-31
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-16K19535/
关键词：
インクレチンＧＩＰ GLP-1 K細胞 L細胞糖尿病

项目摘要

本研究では、インスリン分泌促進作用をもつ消化管ホルモンであるGLP-1とGIPを産生する腸管内分泌L細胞およびK細胞の発生・分化・成熟のメカニズムを解明するために、腸管陰窩に存在するL細胞およびK細胞と腸管絨毛に存在するL細胞およびK細胞をそれぞれ回収し、その遺伝子発現パターンを比較することによりK細胞およびL細胞の発生・分化・成熟に関与する因子を探索するとともに、同定された因子の解析を通じてGLP-1とGIPの分泌制御の機序を明らかにすることを目的とする。L細胞とK細胞の可視化を目的にグルカゴン遺伝子(Gcg)下にGFPを挿入したGcg-GFPヘテロマウスとGIP遺伝子下にGFPを挿入したGIP-GFPヘテロマウスを使用してin vivoで直接腸管に赤色蛍光蛋白Cy3を絨毛上端に導入した。腸管内へCy3遺伝子導入には、絨毛上皮で発現させる実験系intestine-specific gene transfer (iGT)を用いた。GIP-GFPヘテロマウス腸管に様々な濃度のCy3を導入して腸管内赤色蛍光を確認した検討から、腸管絨毛特異的にCy3発現をする最適なCy3濃度を見出した。またiGTによる遺伝子導入が可能かを評価するため、転写因子Pdx1, Rfx6のexpression plasmidやsiRNAをマウス腸管へ導入したところ、expression plasmidによる遺伝子強発現に比較してsiRNAによる遺伝子発現抑制が顕著に認められた。

In this study, the secretion promotion of GLP-1 and GIP in the digestive tract was studied. The development, differentiation and maturation of L cells and K cells in the intestinal endocrine system were clarified. The presence of L cells and K cells in the intestinal fossa and the presence of L cells and K cells in the intestinal villi were investigated. To explore the mechanism of GLP-1 secretion and regulation L cells and K cells are visualized under Gcg and GIP-GFP are used in vivo to directly introduce Cy3 into the upper part of the villi. Cy3 gene transfer in intestinal tract was observed in villous epithelium and intestinal tract. GIP-GFP was introduced into the intestinal tract at a concentration of Cy3, and the optimal Cy3 concentration was found for the identification of red fluorescence in the intestinal tract and for the expression of Cy3 specific to intestinal villi. The expression plasmid of pdx1, rfx6 and siRNA may be introduced into the intestinal tract, and the expression plasmid may inhibit the expression of pdx1, rfx6.