Untersuchungen der Struktur-Funktions-Beziehungen an humanen polymorphen Cytochrom P450-Enzymen mittels ortsgerichteter Spinmarkierung (EPR) und Mutagenese

使用定点自旋标记 (EPR) 和诱变研究人类多态性细胞色素 P450 酶的结构-功能关系

• 批准号: 5076762
• 负责人: Professor Dr. Ivar Roots
• 金额: --
• 依托单位: Institut für Klinische Pharmakologie und Toxikologie (CCM)
• 依托单位国家: 德国
• 项目类别: Research Grants
• 财政年份: 1997
• 资助国家: 德国
• 起止时间: 1996-12-31 至 2003-12-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://gepris.dfg.de/gepris/projekt/5076762?language=en
• 关键词: Untersuchungen; der; Struktur; Funktions; Beziehungen

Auf der Basis des im Vorantrag etablierten rekonstituierten Systems, bestehend aus gereinigtem humanem CYP1A1, humaner NADPH-P450-Reductase und Lipid, werden enzymatische Analysen polymorpher CYP1A1-Varianten durchgeführt, um ihre pharmakologische und physiologische Rolle im Metabolismus bedeutender Arzneimittel und endogener Substrate zu analysieren. Insbesondere soll die Stereo- und Regioselektivität der durch CYP1A1 katalysierten Reaktionen gegenüber Östrogenen und Arachidonsäure analysiert werden. Aus der Analyse der Stereo- und Regioselektivität werden Beiträge zur vergleichenden Analyse der Topologie der aktiven Zentren der CYP1A1-Varianten erwartet. Um die Rolle der physiologischen Redoxpartner der Membran bei der Stimulierung und Regulation der unterschiedlichen enzymatischen Aktivität(en) der CYP1A1-Varianten zu analysieren wird die Wechselwirkung mit NADPH-P450-Reductase und Cytochrom b5 sowie Phospholipiden untersucht. Die enzymatischen Analysen werden mit spektralphotometrischen, EPR-Spinmarkierungs- und CD-Untersuchungen korreliert. Nach CYP1A1 wird die Rolle von CYP2C8 im Metabolismus des neuen hochwirksamen Cholesterolsenkers Cerivastatin analysiert und weitere für den Metabolismus von Arzneimitteln und Arachidonsäure wichtige CYP-Enzymen in die biochemische Charakterisierung einbezogen.

在建立系统的基础上，通过对人CYP 1A 1、人NADPH-P450-还原酶和脂质的研究，韦尔登酶法分析了CYP 1A 1的多态性变体，探讨了它们在药物代谢和内源性底物分析中的药理学和生理学作用。Insbesondere soll die Stereo- und Regioselektivität der durch CYP 1A1 katalysierten Reaktionen gegenüber ostrogenen und Arachidonsäure analysiert韦尔登.通过立体和区域选择性韦尔登分析，可以对CYP 1A 1-变异体的活性中心进行精确的拓扑分析。通过NADPH-P450-还原酶和细胞色素b5对CYP 1A 1-变异体的酶活性的刺激和调节作用的研究，探讨了细胞膜氧化还原酶的生理学作用。酶分析采用分光光度法、EPR-Spinmarkierungs-和CD-检测。CYP 1A 1将在新高胆固醇血症患者代谢中发挥作用，西立伐他汀的分析将有助于研究具有CYP酶生化特性的阿糖胞苷和花生四烯酸代谢。