光プローブを応用した生体イメージング法による画期的術中ライブ診断法の開発

利用光学探针的生物成像方法开发创新的术中活体诊断方法

基本信息

批准号：
23249066
负责人：
尾崎倫孝
金额：
$ 31.03万
依托单位：
Hokkaido University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (A)
财政年份：
2011
资助国家：
日本
起止时间：
2011-04-01 至 2014-03-31
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-23249066/
关键词：
術中診断 CEA Ep-CAM EMA 腫瘍転移光イメージング癌転移

项目摘要

１）光プローブ搭載抗体を用いたin situがん診断のための抗原選定と細胞・小動物実験乳癌、胃癌、大腸癌に対する抗体搭載型光プローブの有効性を細胞・小動物実験にて検証している。診断に最も有効な抗原としてCEA, EMA(Epithelial Membrane Antigen、Ep-CAMを検討し、それらに対して最適な抗体を選別・決定した。乳癌、消化器系癌（胃癌、大腸癌）に対する術中診断法：リンパ節転移検索法の確立 i) リンパ節転移のマーカーとして上皮特異的抗原EMAを中心に検討してきたが、FACS、WBなどによる検討の結果、Ep-CAM、CEA(Carcino-embryonic antigen)がより有用であると考えられた。ii) 抗体の最適化（抗体のサイズの調整あるいは一本鎖・二本鎖の検討）を行ない、生体での最適な腫瘍への最適な送達条件を検討した。iii) Ep-CAM抗体に搭載した光プローブを用いて、担がん小動物（マウス）での効果をin vivoにて確認した。深度、抗原の発現量とシグナル強度・サイズの相関関係の解析を組織学的、分子生物学的解析により行なっている。（２）光プローブを用いた術中迅速診断の精度向上のための検討今年度は実際に光プローブが術中迅速診断の補助になりうるかの検討を開始した。光プローブを用いた癌細胞検出の基本的プロトコールを作成中である。また、組織片をホモジネートとして、迅速診断に利用できないかどうかも、同時に検討している。（３）プローブの最適化および大量生産に関する検討癌を検出する近赤外線発光プローブとして医用分野での実用化を目指しプローブの基盤となるウミホタル・ルシフェラーゼの安全性の高い大量生産・精製法の確立、自己励起型近赤外発光プローブの生産法及びがん標識抗体への搭載法の確立及びその安全性の評価等に向けた実験を開始する。

1）使用配备光探针的抗原选择抗原抗原诊断，并通过细胞和小动物实验验证了配备抗体的抗体光探测器对细胞和小动物实验中乳腺，胃和结肠癌的有效性。 We examined CEA, EMA (Epithelial Membrane Antigen, and Ep-CAM as the most effective antigens for diagnosis, and selected and determined the optimal antibodies for them. Intraoperative diagnosis for breast cancer and digestive cancer (gastric cancer, colon cancer): Establishment of lymph node metastasis search method i) Epithelial-specific antigen EMA has been mainly studied as markers of lymph node转移，但由于使用FACS，WB等进行了研究，EP-CAM和CEA（Carcino-Embryonic抗原）被认为更有用。 ii）进行抗体优化（调节抗体大小或检查单链和双链），以检查活体肿瘤的最佳递送条件。 iii）使用安装在EP-CAM抗体上的光探针在体内证实了含有癌症的小动物（穆斯）的作用。通过组织学和分子生物学分析分析深度，抗原表达水平与信号强度和大小之间的相关性。（2）研究使用光学探针今年提高快速术中诊断的准确性，我们已经开始研究光学探针是否可以实际帮助快速术中诊断。目前正在开发使用光学探针检测癌细胞的基本方案。我们还在考虑是否不能将组织碎片用作快速诊断的匀浆。（3）对检测癌症的近红外发光探针的调查，我们将开始实验，旨在建立一种基于探测器的高度安全的质量生产和纯化方法，建立一种生产自我激发的近红外发光探针的方法，并将其固定在癌症的抗体抗体上，并将其固定在其上。

项目成果

期刊论文数量（9）

专著数量（0）

科研奖励数量（0）

会议论文数量（0）

专利数量（0）

生体イメージング法による細胞・臓器のリアルタイム評価法の開発（Development of the innovative in vivo imaging technique for cell/organ functions）

开发细胞/器官功能的创新体内成像技术

DOI：
发表时间：
2012
期刊：
Organ Biology
影响因子：
0
作者：
芳賀早苗;尾崎倫孝
通讯作者：
尾崎倫孝

Dehydroxymethylepoxyquinomicin (DHMEQ), a novel NF-kappaB inhibitor, inhibits allergic inflammation and airway remodeling in murine models of asthma.

脱羟甲基环氧喹诺星 (DHMEQ) 是一种新型 NF-kappaB 抑制剂，可抑制小鼠哮喘模型中的过敏性炎症和气道重塑。

DOI：
发表时间：
2012
期刊：
Clinical Experimental Allergy
影响因子：
0
作者：
Kenichi Shimizu;Satoshi Konno;Michitaka Ozaki;Kazuo Umezawa;Kenichiro Yamashita;Satoru Todo;Masaharu Nishimura.
通讯作者：
Masaharu Nishimura.

Novel method for intravital monitoring of human cells using far-red luminescence probe in mice.

使用小鼠远红发光探针对人体细胞进行活体监测的新方法。

DOI：
发表时间：
2013
期刊：
Investigative Dermatology
影响因子：
0
作者：
Hongjiang Qiao;Riichiro Abe;Nao Saito;Yasuyuki Fujita;Sanae Haga;Chun Wu;Yoshihiro Ohmiya;Michitaka Ozaki;Hiroshi Shimizu.
通讯作者：
Hiroshi Shimizu.

肝傷害・再生の分子メカニズムとイメージング解析

肝损伤与再生的分子机制及影像学分析