光プローブを応用した生体イメージング法による画期的術中ライブ診断法の開発

利用光学探针的生物成像方法开发创新的术中活体诊断方法

• 批准号: 23249066
• 负责人: 尾崎 倫孝
• 金额: $ 31.03万
• 依托单位: Hokkaido University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (A)
• 财政年份: 2011
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2011-04-01 至 2014-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-23249066/
• 关键词: 術中診断; CEA; Ep-CAM; EMA; 腫瘍転移; 光イメージング; 癌転移

１）光プローブ搭載抗体を用いたin situがん診断のための抗原選定と細胞・小動物実験乳癌、胃癌、大腸癌に対する抗体搭載型光プローブの有効性を細胞・小動物実験にて検証している。診断に最も有効な抗原としてCEA, EMA(Epithelial Membrane Antigen、Ep-CAMを検討し、それらに対して最適な抗体を選別・決定した。乳癌、消化器系癌（胃癌、大腸癌）に対する術中診断法：リンパ節転移検索法の確立 i) リンパ節転移のマーカーとして上皮特異的抗原EMAを中心に検討してきたが、FACS、WBなどによる検討の結果、Ep-CAM、CEA(Carcino-embryonic antigen)がより有用であると考えられた。ii) 抗体の最適化（抗体のサイズの調整あるいは一本鎖・二本鎖の検討）を行ない、生体での最適な腫瘍への最適な送達条件を検討した。iii) Ep-CAM抗体に搭載した光プローブを用いて、担がん小動物（マウス）での効果をin vivoにて確認した。深度、抗原の発現量とシグナル強度・サイズの相関関係の解析を組織学的、分子生物学的解析により行なっている。（２）光プローブを用いた術中迅速診断の精度向上のための検討今年度は実際に光プローブが術中迅速診断の補助になりうるかの検討を開始した。光プローブを用いた癌細胞検出の基本的プロトコールを作成中である。また、組織片をホモジネートとして、迅速診断に利用できないかどうかも、同時に検討している。（３）プローブの最適化および大量生産に関する検討癌を検出する近赤外線発光プローブとして医用分野での実用化を目指しプローブの基盤となるウミホタル・ルシフェラーゼの安全性の高い大量生産・精製法の確立、自己励起型近赤外発光プローブの生産法及びがん標識抗体への搭載法の確立及びその安全性の評価等に向けた実験を開始する。

1) Hikaribo is equipped with antibodies that can be used in Situ diagnosis and treatment of antigen-selected cells and small animals for breast cancer, gastric cancer, and colorectal cancer. The most effective antigen for diagnosis is CEA, EMA (Epithelial Membrane) Antigen, Ep-CAM を検し, それらに対してoptimal antibody を selection and determination した Breast cancer, gastrointestinal cancer (stomach cancer, colorectal cancer) に対する intraoperative diagnosis method: リンパパ転検andra method established i) Epithelial-specific antigen EMAをcenterに検してきたが、FACS、WBなどによる検のresults、Ep-CAM、CEA(Carcino-embryonic antigen)がより is useful and the test is good. ii) Optimization of the antibody (Antibody のサイズのadjusting あるいは一 lock・二本 lockの検) を行ない, 生生でのoptimalなswelling へのOptimum delivery conditions を検 Discussion した. iii) The Ep-CAM antibody has been tested for its use in light-emitting diodes, and its effect on small animals has been confirmed in vivo. Depth, antigen の発 actual amount とシグナル intensity・サイズの correlation analysis のhistology, molecular biology analysis により行なっている. (2) This year's review of the rapid intraoperative diagnosis and improved accuracy of Hikari Medical実记に光プローブが intraoperative rapid diagnosis and assistance になりうるかの検asking for をstart した. Light プローブを is made from the basic プロトコールを of the cancer cell 検出の中である.また、Tissue film をホモジネートとして、Use of rapid diagnosis できないかどうかも、Simultaneous に検している. （３）Optimization and mass production of light source Medical grade medical grade Establishment of high-safety mass production and refining methods, self-produced near-infrared radiant light production method The establishment of the method for carrying labeled antibodies and the evaluation of the safety of these antibodies have begun.

项目成果

生体イメージング法による細胞・臓器のリアルタイム評価 法の開発（Development of the innovative in vivo imaging technique for cell/organ functions）

开发细胞/器官功能的创新体内成像技术

• 发表时间: 2012
• 期刊: Organ Biology
• 作者: 芳賀早苗;尾崎倫孝
• 通讯作者: 尾崎倫孝

Novel method for intravital monitoring of human cells using far-red luminescence probe in mice.

使用小鼠远红发光探针对人体细胞进行活体监测的新方法。

• 发表时间: 2013
• 期刊: Investigative Dermatology
• 作者: Hongjiang Qiao;Riichiro Abe;Nao Saito;Yasuyuki Fujita;Sanae Haga;Chun Wu;Yoshihiro Ohmiya;Michitaka Ozaki;Hiroshi Shimizu.
• 通讯作者: Hiroshi Shimizu.

Dehydroxymethylepoxyquinomicin (DHMEQ), a novel NF-kappaB inhibitor, inhibits allergic inflammation and airway remodeling in murine models of asthma.

脱羟甲基环氧喹诺星 (DHMEQ) 是一种新型 NF-kappaB 抑制剂，可抑制小鼠哮喘模型中的过敏性炎症和气道重塑。

• 发表时间: 2012
• 期刊: Clinical Experimental Allergy
• 作者: Kenichi Shimizu;Satoshi Konno;Michitaka Ozaki;Kazuo Umezawa;Kenichiro Yamashita;Satoru Todo;Masaharu Nishimura.
• 通讯作者: Masaharu Nishimura.

「外科的ストレスにたいする肝の分子応答機構Molecular Mechanism of Stress Response of Liver」

《肝脏应激反应的分子机制》

• 发表时间: 2013
• 作者: Igawa S;Kishibe M;Honma M;Murakami M;Mizuno Y;Suga Y;Seishima M;Ohguchi Y;Akiyama M;Hirose K;Ishida-Yamamoto A;Iizuka H.;尾崎倫孝
• 通讯作者: 尾崎倫孝

「虚血/再灌流傷害における高血糖および脂肪化病態肝の反応性の相違」

“缺血/再灌注损伤中高血糖和脂肪肝反应性的差异”

• 发表时间: 2012
• 作者: 2.芳賀 早苗;小澤 岳昌;森田 直樹;阿部 理一郎;藤堂 省;尾崎 倫孝
• 通讯作者: 尾崎 倫孝