新規分子機能プローブ開発による生体・臓器内分子機能診断への応用

开发新型分子功能探针，应用于生物体和器官的分子功能诊断

• 批准号: 19659317
• 负责人: 尾崎 倫孝
• 金额: $ 2.11万
• 依托单位: Hokkaido University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 2007
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2007 至 2008
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-19659317/
• 关键词: 生体イメージング; 分子機能; 可視化; 肝障害; アポトーシス; カスパーゼ活性; ルシフェラーゼ; レドックス

臓器内・生体内の細胞・分子機能を評価するための新たな分子機能プローブを開発する目的で、luciferaseを利用した分子機能プローブを新たに開発し、生体イメージングへの応用を試みる。1)前年度作成したCaspase-3にたいするプローブをアデノウィルスベクターに組み込み、これを細胞実験およびマウス肝における生体イメージング実験のためのベクターとした。a)アデノウィルスベクターの作成、増幅、精製および力価測定。b)アデノウィルスベクターによる肝細胞およびマウス肝への遺伝子導入効率の確認と発現解析により、マウスにおけるプローブ発現の最適条件を検討した。2)細胞レベルでプローブの有効性を確認a)細胞内に発現したプローブの刺激(Staurosporin、低酸素・再酸素化刺激)に対する感受性を検討・確認した。b)プローブの反復刺激に対して、再現性を有することを確認した。c)反応の持続性(経時的変化)を確認し、刺激に対するCaspase-3活性のダイナミズムを解析し、病態の理解を試みた。3)プローブの生体内での評価アデノウィルスベクターをもちいて、マウスの肝にプローブを特異的に発現させ、種々の病態におけるシグナルを確認した。モデルとして、以下のものを作成し、検討した。シグナルの解析は、生体イメージング装置にて、リアルタイムに行ない、経時的にシグナルの変化を測定した。a)マウスFas刺激、CC1_4による急性肝炎(急性肝障害)モデルにおけるプローブの有効性を確認し、障害の変化を経時的に観測した。b)マウス肝虚血・再潅流モデルにて、同様に障害の程度と変化を生体イメージング装置にて観測することに成功した。これらの実験の結果、本研究により作成したプローブの小動物(生体)での有用性が確認され、今後中動物、さらには将来的な臨床応用に向けた研究を行う予定である。

In vivo, the cellular and molecular mechanisms are involved in the development of new molecular mechanisms. The molecular mechanisms are used to start the purpose of the experiment, the luciferase uses the molecular energy to activate the new drugs, and the bioactive drugs are used to test the drugs. 1) in the previous year, we made a study of the Caspase-3 health care system in the previous year, which was completed in the previous year. A) make sure that the equipment is made, the width and the precision are measured. B) I need to know that the rate of admission is very high, so that I can find the best condition. 2) intracellular stimulation (Staurosporin, low acidity and reacidification) was detected in vivo, and the receptivity was detected. B) there is a negative response to the stimulation, and then there is a confirmation of the sex. C) reversal of persistence (temporary deterioration) confirmation, stimulation of Caspase-3 activity, response analysis, and pathological understanding test. 3) the diagnosis and treatment of the disease in the body, the detection of the disease, the diagnosis of the disease, the detection of the disease, the diagnosis of the disease, the detection of the disease, the diagnosis of the disease, the detection of the disease, the Please do not know what to do, and the following will be done. In the process of analysis, the equipment is in good condition, and the equipment is in good condition. A) after Fas stimulation and CC1_4 treatment of acute hepatitis (acute liver failure), abnormal sexual confirmation and abnormal symptoms were observed in patients with acute hepatitis. B) the blood flow due to liver deficiency is similar to the degree of injury, so that the device can be successfully treated. Based on the results of this study, the results of this study are as follows: in this study, the results of this study are designed to confirm the usefulness of small animals (live animals), and to determine the future development of small animals.

项目成果

細胞・臓器機能の生体イメージング

细胞和器官功能的生物成像

• 发表时间: 2008
• 期刊: Organ Biology 15
• 作者: 柴田裕希;多島良;原科幸彦;Shigehiko Tateno;sanae Haga;Shigehiko Tateno;Ogasawara K;Hiroshi Osawa;Shigehiko Tateno;Kajiwara M;Hiroshi Osawa;Hui-qi Zhang;Ogasawara K;大澤弘始;Hiroshi Osawa;大澤弘始;Aoki M;Hiroshi Osawa;芳賀早苗
• 通讯作者: 芳賀早苗

新規レドックス感受性GFPプローブをもちいた肝細胞内レドックスのイメージング

使用新型氧化还原敏感 GFP 探针对肝细胞内氧化还原进行成像

• 发表时间: 2007
• 作者: 芳賀早苗;五十嵐瑠美;古川博之;藤堂省;尾崎倫孝
• 通讯作者: 尾崎倫孝

Preventing hypoxia/reoxygenation damage to hepatocytes by p66shc ablation:: Up-regulation of anti-oxidant and anti-apoptotic proteins

• DOI: 10.1016/j.jhep.2007.11.018
• 发表时间: 2008-03-01
• 期刊: JOURNAL OF HEPATOLOGY
• 影响因子: 25.7
• 作者: Haga, Sanae;Terui, Keita;Ozaki, Michitaka
• 通讯作者: Ozaki, Michitaka

レドックス感受性GFPプローブをもちいた肝細胞内レドックスのイメージング

使用氧化还原敏感 GFP 探针对肝细胞内氧化还原进行成像

• 发表时间: 2008
• 作者: Sanae Haga;Keita Terui;Moto Fukai;Yuko Oikawa;Kaikobad Irani;Hiroyuki Furukawa;Satoru Todo;Michitaka Ozaki;Hidetoshi Akimoto;尾崎倫孝;芳賀早苗
• 通讯作者: 芳賀早苗

The Survival Pathways Phosphatidylinositol-3 Kinase (PI3-K)/Phosphoinositide-Dependent Protein Kinase 1 (PDK1)/Akt Modulate Liver Regeneration Through Hepatocyte Size Rather Than Proliferation

• DOI: 10.1002/hep.22583
• 发表时间: 2009-01-01
• 期刊: HEPATOLOGY
• 影响因子: 13.5
• 作者: Haga, Sanae;Ozaki, Michitaka;Todo, Satoru
• 通讯作者: Todo, Satoru