新規アルツハイマー病原因因子に対する薬剤スクリーニング法の開発とその有効性評価

阿尔茨海默病新致病因素药物筛选方法的开发及其有效性评价

• 批准号: 26860086
• 负责人: 西山 尚志
• 金额: $ 2.5万
• 依托单位: Foundation for Biomedical Research and Innovation
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2014
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2014-04-01 至 2015-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-26860086/
• 关键词: アルツハイマー病; 薬剤スクリーニング; 発光検出系

アルツハイマー病の治療標的として、これまでに脳内アミロイド斑全てに大量に確認出来るAmyloid beta（Aβ）に着目した研究がなされてきた。しかしながら、Aβ自体よりも、Aβを基にした構造体がアルツハイマー病に大きく関与している事が明らかとなってきている。申請者は、Aβ由来の毒性集合体であるASPDに着目し、Aβとそのレセプターの結合を阻害する薬剤のスクリーニング系の開発を行った。まずはスクリーニング系のSN比を高いものとするため、リガンドとして、セレンテラジンを基質とする強力な発光タンパクであるGaussia luciferase （Gluc）をASPDに付加する方法を開発した。レセプターとしては、当初はHEK293細胞に強制発現させ、これをレセプターとする予定であったが、当該レセプターの性質上、強制発現では機能しなかった為、ラットの生体脳海馬より直接抽出し、これを発光用ELISA plateに固相化する方法を開発した。こうして開発した系を、すでにASPDとレセプターの結合阻害活性を持つことが判明しているペプチド（阻害ペプチド）を利用し、実際にスクリーニング系として機能するか確認したところ、阻害ペプチドを作用させた群において、明らかにGlucの発光が減少していた。系の改善の余地は存在するが、以上を総括すると、Glucを利用した高感度なアルツハイマー病に対するスクリーニング系を開発することが出来た。

In the treatment of the disease, there was a lot of confirmation of Amyloid beta (A β) in the treatment of the disease. A β autograft, A β autologous body, A β autograft, and so on. The applicant and A β toxicant aggregates were targeted at ASPD, and A β was used in combination with the prevention and treatment of harmful agents. The general information system is that the SN is higher than the general information, the information is higher than the general information, and there is a high level of information on the Gaussia luciferase (Gluc) plus ASPD payment method. In the first place, the HEK293 cell forced the system to operate in a predetermined condition, and when the system was used, the machine was operated on, the machine was extracted directly from the sea, and the ELISA plate solid phase method was used in the system. The monitoring system, the ASPD monitoring system combined with the anti-damage activity, the monitoring system, the monitoring system, the monitoring system, There is a lot of room for improvement, the above information includes information, and Gluc is responsible for the use of high-sensitivity medical treatment.