既存の抗ヘルペスウイルス薬とは異なる作用機序の薬剤スクリーニング系の開発

开发与现有抗疱疹病毒药物作用机制不同的药物筛选系统

• 批准号: 20659071
• 负责人: 川口 寧
• 金额: $ 2.05万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Challenging Exploratory Research
• 财政年份: 2008
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2008 至 2009
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-20659071/
• 关键词: HSV; 抗ウイルス剤; スクリーニング系

本研究では、研究代表者が世界に先駆けて開発した、(i)単純ヘルペスウイルス(HSV:herpes simplex virus)感染細胞のリアルタイムイメージング技術、および、(ii)ウイルス特異酵素試験管内アッセイ系を応用し、既存の抗HSV薬とは異なる作用機序の薬剤スクリーニング系を開発することを目的とする。本年度は、既に作製済みの、HSVの3つのコンポーネントを異なる蛍光蛋白質で標識した組み換えウイルス(YK608)を用いて、細胞を96マルチウエルプレートに捲き、YK608を感染させ、自動電動ステージ付きの共焦点レーザー顕微鏡で感染細胞における各ウイルスコンポーネントの局在変化を各ウエルごとに観察することが可能となった。つまり、多検体においてウイルス粒子成熟過程の解析が可能な系を確立した。これによって、ウイルス粒子成熟過程を標的とした新しい抗ウイルス剤のスクリーニングが可能となるものと考えられる。また、昨年度、得られた知見である、「HSV PK Us3の自己リン酸化は感染細胞におけるUs3 PK活性を制御している」に関しては、Us3の自己リン酸化がマウス動物モデルにおける病原性発現にも関与していることが明らかになった。抗ウイルス剤スクリーニングの標的であるUs3の自己リン酸化現象は、ウイルスの病原性発現を制御していることが示唆され、新しい抗ウイルス剤開発に寄与するものと考えられた。また、昨年作製したUs3の自己リン酸化を特異的に認識するリン酸化単クローン抗体が酵素抗体法に供することができることが明らかになり、Us3活性化を標的とした新しい抗ウイルス薬のスクリーニングが可能となると考えられた。

This study で は representatives, research が world に 駆 first け て open 発 し た, (I) 単 pure ヘ ル ペ ス ウ イ ル ス (HSV: herpes simplex Virus get) infected cells の リ ア ル タ イ ム イ メ ー ジ ン グ technology, お よ び, (ii) ウ イ ル ス specific enzyme test tube ア ッ セ イ department を 応 し, existing の anti HSV 薬 と は different な る function machine sequence の 薬 tonic ス ク リ ー ニ ン グ started を 発 す る こ と を purpose と す る. は this year, both に system 済 み の, HSV の 3 つ の コ ン ポ ー ネ ン ト を different な る 蛍 light protein で logo し み た group in え ウ イ ル ス (YK608) を い て, cell を 96 マ ル チ ウ エ ル プ レ ー ト に き, YK608 を infection さ せ, automatic electric ス テ ー ジ pay き の total focus レ ー ザ ー 顕 micromirror で infected cells に お け る each ウ イ ル ス コ ン ポ ー ネ ン ト の bureau in を - each ウ エ ル ご と に 観 examine す る こ と が may と な っ た. つ ま り, much 検 に お い て ウ イ ル ス particle can mature process analytical が の を な department establish し た. こ れ に よ っ て, ウ イ ル ス particle maturation を mark と し た new し い resistance ウ イ ル ス tonic の ス ク リ ー ニ ン グ が may と な る も の と exam え ら れ る. ま た, last year, have to ら れ た knowledge で あ る, "HSV PK Us3 の himself リ ン acidification は infected cells に お け る Us3 PK activity を suppression し て い る" に masato し て は, Us3 の himself リ ン acidification が マ ウ ス animal モ デ ル に お け る pathogenicity 発 now に も masato and し て い る こ と が Ming ら か に な っ た. Resistance ウ イ ル ス tonic ス ク リ ー ニ ン グ の mark で あ る Us3 の himself リ ン acidification は, ウ イ ル ス の pathogenicity 発 now を suppression し て い る こ と が in stopping さ れ, new し い resistance ウ イ ル ス tonic open 発 に send す る も の と exam え ら れ た. ま た, yesterday in cropping し た Us3 の himself リ ン acidification を specific に know す る リ ン acidification 単 ク ロ ー ン に antibodies が enzyme method for す る こ と が で き る こ と が Ming ら か に な り, Us3 activeness を mark と し た new し い resistance ウ イ ル ス 薬 の ス ク リ ー ニ ン グ が may と な る と exam え ら れ た.

项目成果

Epstein-Barr virus protein kinase BGLF4 interacts with viral transactivator BZLF1 and regulates its transactivation activity

• DOI: 10.1099/vir.0.010462-0
• 发表时间: 2009-07-01
• 期刊: JOURNAL OF GENERAL VIROLOGY
• 影响因子: 3.8
• 作者: Asai, Risa;Kato, Ai;Kawaguchi, Yasushi
• 通讯作者: Kawaguchi, Yasushi

組換えイルス、これを保持する大腸菌およびその製造法

重组病毒、携带该病毒的大肠杆菌及其生产方法

• 发表时间: 2008

Regulation of the catalytic activity of HSV protein kinase Us3 and its role in pathogenesis

HSV蛋白激酶Us3催化活性的调控及其在发病机制中的作用

• 发表时间: 2009
• 作者: Y.Kawaguchi;et al.
• 通讯作者: et al.

Molecular mechanisms of viral replication and pathogenesis unveiled by fluorescent herpes simplex viruses

荧光单纯疱疹病毒揭示病毒复制和发病机制的分子机制

• 发表时间: 2008
• 作者: Y.Kawaguchi;et al.;Y.Kawaguchi
• 通讯作者: Y.Kawaguchi

Differences in the Regulatory and Functional Effects of the Us3 Protein Kinase Activities of Herpes Simplex Virus 1 and 2

• DOI: 10.1128/jvi.00993-09
• 发表时间: 2009-11-15
• 期刊: JOURNAL OF VIROLOGY
• 影响因子: 5.4
• 作者: Morimoto, Tomomi;Arii, Jun;Kawaguchi, Yasushi
• 通讯作者: Kawaguchi, Yasushi