マダニ感染モデルを用いたダニ媒介性ウイルスの感染機構解明に向けた国際共同研究

マダニは多様な病原体を媒介し、中でも致死性が高いダニ媒介性人獣共通感染症ウイルスは旧大陸の広範な地域で流行しており、その流行防止対策は重要な課題となっている。そのためには、マダニにおけるウイルス感染機構を明らかにし、それを対象とした疾病制御法を確立する必要がある。しかしマダニの細胞や生体の飼育系等、解析するための実験系が確立していないため、ウイルス感染機構の詳細な解析は世界的にも困難な状況にある。そこで本研究では、マダニのバイオリソースを用いてウイルス感染モデルの構築を行い、それを活用してダニ媒介性ウイルスの感染・伝播機序の解析を行う。本年度での研究では、昨年度までの研究でマダニの中でのウイルス増殖への関連性が示されたダニ媒介性脳炎ウイルス（TBEV）のウイルス遺伝子RNA中の3’UTR領域に高度に保存されている領域について、変異や欠損を導入したウイルスをリバースジェネティクスにより作製して解析を行った。野生型のTBEVでは2つの長さの異なるncRNAが産生されているのが検出された所、変異を導入したウイルスでは短いサイズのncRNAのみが産生されており、この領域がウイルス由来ncRNAの産生に関与している事が示された。培養細胞での増殖性について検討した所、変異を導入したウイルスは、哺乳動物及びマダニ細胞では増殖性には影響を受けていない事が示された。またマウスモデルに皮下接種した所、変異ウイルスにおいて死亡率の上昇が認められ、ncRNAがウイルスの病原性に哺乳動物の影響している事が示された。

マダニは多様な病原体を媒介し、中でも致死性が高いダニ媒介性人獣共通感染症ウイルスは旧大陸の広範な地域で流行しており、その流行防止対策は重要な課題となっている。そのためには、マダニにおけるウイルス感染機構を明らかにし、それを対象とした疾病制御法を確立する必要がある。しかしマダニの細胞や生体の飼育系等、解析するための実験系が確立していないため、ウイルス感染機構の詳細な解析は世界的にも困難な状況にある。そこで本研究では、マダニのバイオリソースを用いてウイルス感染モデルの構築を行い、それを活用してダニ媒介性ウイルスの感染・伝播機序の解析を行う。本年度での研究では、昨年度までの研究でマダニの中でのウイルス増殖への関連性が示されたダニ媒介性脳炎ウイルス（TBEV）のウイルス遺伝子RNA中の3’UTR領域に高度に保存されている領域について、変異や欠損を導入したウイルスをリバースジェネティクスにより作製して解析を行った。野生型のTBEVでは2つの長さの異なるncRNAが産生されているのが検出された所、変異を導入したウイルスでは短いサイズのncRNAのみが産生されており、この領域がウイルス由来ncRNAの産生に関与している事が示された。培養細胞での増殖性について検討した所、変異を導入したウイルスは、哺乳動物及びマダニ細胞では増殖性には影響を受けていない事が示された。またマウスモデルに皮下接種した所、変異ウイルスにおいて死亡率の上昇が認められ、ncRNAがウイルスの病原性に哺乳動物の影響している事が示された。