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フラビウイルスの媒介節足動物種特異性に関する研究

黄病毒载体节肢动物物种特异性研究

基本信息

批准号：
04J09154
负责人：
好井健太朗
金额：
$ 1.22万
依托单位：
Hokkaido University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
财政年份：
2004
资助国家：
日本
起止时间：
2004 至 2005
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-04J09154/
关键词：
フラビウイルスレプリコンパッケージングキメラ

项目摘要

フラビウイルスには多くの人畜共通感染症の原因ウイルスが含まれ、その多くは節足動物(ダニ、蚊)によって媒介される。ダニ/蚊媒介性のフラビウイルスは哺乳動物細胞では同様に感染し増殖するが、ダニ/蚊においては各々の媒介動物でしかウイルスは増殖せず、媒介動物特異的な感染・増殖様式の存在が示唆されるが詳細は明らかではない。ウイルスのゲノムより構造蛋白をコードする領域を欠損させたレプリコンは、細胞内において自己の複製は起こるが、構造蛋白が産生されないため、感染性のある粒子が放出されないため、ウイルスの複製機構の研究において有用な系として扱われている。そこでフラビウイルスの媒介動物特異的な増殖様式を解明するために、レプリコンを用いたダニ媒介性脳炎ウイルス(TBEV)および日本脳炎ウイルス(JEV:蚊媒介性)のキメラウイルス様粒子(キメラVLPs)を作成することを試みた。本研究において、ダニ媒介性フラビウイルスであるTBEVのレプリコンを北海道分離株Oshima株の感染性cDNAクローンを用いて構築し、また蚊媒介性のJEVの構造蛋白を発現するプラスミドをレプリコン導入細胞にトランスフェクトすることにより、JEV由来の粒子構造を持ちTBEVのレプリコンをゲノムとして持つキメラVLPsを分泌させた。キメラVLPsは一度のみの感染性を有しており、相補的に発現させた構造蛋白のmRNAとのrecombinationも起こしておらず、安全性にも優れていることが示された。また、キメラVLPsの節足動物由来培養細胞への感染性を検討することにより、フラビウイルスの媒介節足動物の特異性にはウイルスの侵入・増殖に関わる特異的な因子が関わっていることが示された。これらの成績はフラビウイルスの自然界における存続様式の解明に重要な知見をもたらし、今後のフラビウイルス感染症の疾病制御への展開が期待される。

The cause of zoonotic infections in humans and animals is mainly caused by arthropods (mosquitoes). Vector-specific infection and propagation of mammalian cells are indicated in detail by the presence of vector specific infection and propagation in each vector animal. It is necessary to construct proteins in the field, to reproduce themselves in the cell, to produce infectious particles, to reproduce in the cell, and to study useful systems. The vector animal specific breeding pattern is explained in detail in the following ways: the vector animal specific breeding pattern is explained in the following ways: the In this study, we constructed infectious cDNA sequences from Hokkaido isolate Oshima strain, and produced structural proteins from JEV vector introduced into cells. The structure of JEV derived particles was determined by TBEV cDNA sequences. VLPs are highly infectious and complementary, and they can be found in the mRNA recombination of structural proteins. The infectivity of arthropod derived culture cells was investigated by using vector specific factors related to arthropod invasion and propagation. The results of this study are expected to be reflected in the understanding of important aspects of the natural world and the development of disease control in the future.