ハイスループット・ハイコンテンツイメージングを用いたEBV関連腫瘍形成の解析

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エプスタイン・バールウイルス(EBV)は、ガンマヘルペスウイルス亜科に属するヒトヘルペスウイルスである。EBVは上咽頭癌、胃癌、バーキットリンパ腫などの悪性腫瘍との関連が指摘されているがんウイルスであり、臨床上重要なウイルスであると言える。EBV感染症及び関連がんの克服のためには潜伏感染成立までの期間(「前潜伏感染期」と呼ばれている)においてどのようなウイルス遺伝子が発現し、宿主因子が制御されているか研究することは非常に重要である。これまでの年度の研究において、EBVの前潜伏感染期で必須の遺伝子であるIMPDH2を同定している。IMPDH2は非ウイルス性のがん細胞の増殖に必須の因子として同定され、がん細胞の細胞内代謝を変化させることで増殖を亢進させ、その結果、がん細胞の核小体を肥大化させる。本研究において前潜伏感染期の細胞でIMPDH2の発現が亢進し、核小体の肥大化が起きていることを発見している。また、IMPDH2阻害剤を用いて活性を阻害した結果、前潜伏感染期の細胞増殖および不死化成立は著しく低下した。本年度の研究では、これらの発見をさらに発展させるべく、EBV感染におけるIMPDH2の意義をさらに検討した。siRNAを用いてIMPDH2をノックダウンした結果、核小体の大きさは減少しており、前潜伏感染期の初代培養細胞・細胞株いずれにおいてもIMPDH2の発現レベルと核小体の大きさに強い相関が見られた。また溶解感染において蛍光免疫染色およびRNA-seqを実施した結果、溶解感染誘導後、核小体関連タンパク質の発現は上昇していた。今後はこれらの現象と、IMPDH2の発現の相関を検討する予定である。また、これらの研究結果を論文にまとめ、現在投稿中である