Molecular biology and function of cytosolic phospholipase A in plant signal transduction

磷脂酶A2是一种参与胎盘信号转导的酶，它可能是第二信使。生长素或激发子与受体结合的方法和生理反应都能提高韦尔登。对磷脂酶A（iPLA）进行了一系列的细胞溶质测定，沃登，并对两种类型的钙结合动机和含钙结合动机的动机进行了比较，从而确定了激活机制。采用分子生物学方法，通过体外多点iPLA基因韦尔登进行功能测试。通过表达式系统可以并行地解决iPLA的酶特性问题。拟南芥的Mit转化包括正义、反义、绿色蛋白质和GUS报告基因的构建以及基因表达和表型的研究。采用分子生物学方法研究脂质代谢物的生物化学和生理学，在信号转导过程中产生韦尔登，从而获得韦尔登。Dabei ist jetzt schon klar，dazzt der Lipid Metabolismus，den wir mithilfe einer neuen Methodik in Zellkulturzellen（Peterslie）beobachten könnnen，nach dem Signal Auxin anders verläuft als nach dem Signal Elicitor. Bei诱导剂-治疗治疗zusätzliche代谢物auf，die untersucht韦尔登sollen bzw.酶调节的最新进展。这是通过劳动和劳动群体的努力，很难用激发剂-刺激剂来提高细胞溶质钙。我们研究了脂质代谢异常的生长因子受体，但也不能用生长素刺激细胞内钙离子。Sussmann（麦迪逊，美国）和Alan Jones（查佩尔山，北卡罗来纳州，美国），在生物化学与A. Pugin（第戎戎，Frankreich）.

Die pflanzlichen Phospholipase A2 wurde im Labor des Antragstellers entdeckt, und ist ein Enzym in der Signaltransduktion der Pflanzen, das die Lipidbruchstücke Fettsäure(n) und Lysophospholipid(e) als potentielle Second Messenger herstellt. Die Schritte zwischen der Bindung von Auxin oder Elicitor an den Rezeptor und den physiologischen Reaktionen sollen aufgeklärt werden. Sequenzen für eindeutig cytosolische pflanzliche Phospholipasen A (iPLA) sind gefunden worden, und zwar offenbar zwei Typen, eine ohne calcium-bindendes Motiv und eine mit einem solchen Motiv, die sich entsprechend im Aktivierungsmechanismu unterscheiden könnten. Um dies mit molekularbiologischen Methoden zu untersuchen, sollen als Funktionstests eine Serie von Hefe-Komplementationen mit in vitro mutierten iPLA-Genen durchgeführt werden. Parallel dazu sollen die enzymatischen Eigenschaften der entsprechenden iPLAs aus Expressions- systemen untersucht werden. Mit Transformation von Arabidopsis mittels Sense- und Antisense-, Grün-Fluoreszenz-Protein- und GUS-Reporter-Gen-Konstrukten und der Untersuchung von Genexpression und Phänotypen soll die Funktion der iPLA-Gene weiter nachgeprüft werden. Hand in Hand mit den molekularbiologisch orientierten Methoden soll die Biochemie und Physiologie der Lipid-Metabolite, die im Zuge der Signaltransduktion gebildet werden, untersucht werden. Dabei ist jetzt schon klar, daß der Lipid-Metabolismus, den wir mithilfe einer neuen Methodik in Zellkulturzellen (Petersilie) beobachten können, nach dem Signal Auxin anders verläuft als nach dem Signal Elicitor. Bei Elicitor-Behandlung treten zusätzliche Metabolite auf, die untersucht werden sollen bzw. die dahinter steckenden enzymatischen Regulationen. Es ist durch die Arbeit anderer Arbeitsgruppen bekannt, daß sich nach Elicitor-Stimulierung das cytosolische Calcium erhöht. Wir vermuten, daß einerseits die verschiedenen Rezeptoren die Verschiedenheit im Lipid-Metabolismus bewirken, aber auch, daß nach Auxin Stimulierung das cytosolische Calcium nicht erhöht wird.In den molekularbiologischen Arbeiten kooperieren wir mit Prof. M. Sussmann (Madison, USA) und Alan Jones (Chapel Hill, NC, USA), in den biochemischen mit Prof. A. Pugin (Dijon, Frankreich).