高親和性カリウム輸送系の細胞生理学的研究

高亲和力钾转运系统的细胞生理研究

• 批准号: 08740620
• 负责人: 且原 真木
• 金额: $ 0.58万
• 依托单位: Okayama University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1996
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1996 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-08740620/
• 关键词: カリウム輸送系; オオムギ; 環境ストレス; RT-PCR

本研究では資源作物オオムギからの高親和性カリウム輸送系遺伝子の同定し,環境および植物体の組織による高親和性カリウム輸送系発現の調節を解明することを目指した。酵母から数種、植物ではコムギから1種類報告されていた高親和性カウム輸送系遺伝子において認められた共通のアミノ酸配列部分に対応する20から30の塩基配列を人工合成した。上流プライマーとして5種類(TRK1、TRK3、TRK5、MH1、MH2)作成した。下流プライマーとして4種類(TRK2、TRK4、HR2、HR3)作成した。高親和性カリウム輸送系は、カリウム欠乏条件で発現していると考えられている。そこで標準の培養液からカリウム塩を除いた条件で、2週間水耕栽培したオオムギ(品種赤神力)の根からRNAを抽出し、cDNAに変換した後、上記プライマーを上流、下流いろいろな組み合わせを使って高親和性カリウム輸送系遺伝子のPCRによる増幅を試みた。様々なPCR条件を検討したが結局いかなる組み合わせを用いてもPCR産物を得ることができなかった。名古屋大学のグループによると(未発表データ)、アラビドプシスにおいて、TRK1(5'-GGIAAYACIYTITTYCC-3')とTRK2(5'-VDIGGIARRTACATCAT-3')の組み合わせで、高親和性カリウム輸送系遺伝子を増幅することができたという。オオムギでは、このプライマーの組み合わせでもPCR産物は得ることができなかったので、アラビドプシスとは、遺伝子の塩基配列が多少異なるのかも知れない。あるいは、今回用いた栽培条件では高親和性カリウム輸送系が発現していなかったという可能性もあるので、現在栽培条件を変えて(0.25mMの硫酸カルシウムのみの培地)1週間育てたオオムギからRNAを抽出して、再度PCRをおこなっている。

This study で は resources crops オ オ ム ギ か ら の high-affinity カ リ ウ ム conveying system heritage 伝 son の with し, environmental お よ び の plant body tissue に よ る high-affinity カ リ ウ ム transport department 発 now の adjust を interpret す る こ と を refers し た. Yeast か ら several, plant で は コ ム ギ か ら 1 kind report さ れ て い た high-affinity カ ウ ム conveying system heritage 伝 son に お い て recognize め ら れ た common の ア ミ ノ acid with column section に 応 seaborne す る 20 か ら 30 の salt base with column を synthetic し た. From the upper stream, プラ プラ と と と と て five types (TRK1, TRK3, TRK5, MH1, MH2) are made into た た. The four types (TRK2, TRK4, HR2, HR3) are made into プラ た. High-affinity カリウム transport systems で and カリウム lack of conditions で occur <s:1> て ると ると test えられて る る る そ こ で standard の culture か ら カ リ ウ ム salt を except い で た conditions, 2 weeks between hydroponic cultivation し た オ オ ム ギ (varieties red power) の root か ら RNA を spare し, cDNA に variations in し た, written after プ ラ イ マ ー を upper-class, obscene い ろ い ろ な group み close わ せ を make っ て high-affinity カ リ ウ ム conveying system heritage 伝 son の PCR に よ る raised を try み Youdaoplaceholder0. Others 々 な PCR conditions を beg し 検 た が ending い か な る group み close わ せ を with い て を も PCR products have る こ と が で き な か っ た. Nagoya university の グ ル ー プ に よ る と (not 発 デ ー タ), ア ラ ビ ド プ シ ス に お い て, TRK1 (5 '- GGIAAYACIYTITTYCC - 3) と TRK2 (5' - VDIGGIARRTACATCAT - 3) の group み close わ せ で, high affinity カ リ ウ ム conveying system 伝 を son raised す picture Youdaoplaceholder0 とがで たと たと たと う. オ オ ム ギ で は, こ の プ ラ イ マ ー の group み close わ せ で は も PCR products have る こ と が で き な か っ た の で, ア ラ ビ ド プ シ ス と は, but 伝 の salt base with how many different columns が な る の か も know れ な い. あ る い は, this reuse い た cultivation conditions で は high-affinity カ リ ウ ム conveying system が 発 now し て い な か っ た と い う possibility も あ る の で, now cultivated condition を - え て (0.25 mM の sulfate カ ル シ ウ ム の み の petty) between 1 week) て た オ オ ム ギ か ら RNA を spare し て again, PCR を お こ な っ て い る.

项目成果

M.Katsuhara,T.Kawasaki: "Salt Stress Induced Nuclear DNA Degradation in Meristematic Cells of Barley Roots" Plant Cell Physiology. 37(2). 169-173 (1996)

M.Katsuhara、T.Kawasaki：“盐胁迫诱导大麦根分生组织细胞中的核 DNA 降解”植物细胞生理学。

M.Katsuhara,Y.Yazaki,K.Sakano,T.Kawasaki: "Intracellular pH and Proton-Transport in Barley Root Cells under Salt Stress : in Vivo ^<31>P-NMR Study" Plant Cell Physiology. 38(2). 155-160 (1997)

M.Katsuhara，Y.Yazaki，K.Sakano，T.Kawasaki：“盐胁迫下大麦根细胞的细胞内pH和质子传输：体内^ 31 P-NMR研究”植物细胞生理学。