アセチルコリンによる潜伏感染オーエスキー病ウイルス再活性化機構の解明

乙酰胆碱对潜伏感染奥耶斯基病病毒的再激活机制的阐明

• 批准号: 08760301
• 负责人: 田中 聖一
• 金额: $ 0.64万
• 依托单位: 大分医科大学
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1996
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1996 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-08760301/
• 关键词: オーエスキー病; 潜伏感染; アセチルコリン; 再活性化

我々はすでにオーエスキー病ウイルスが潜伏感染した豚の三叉神経節をアセチルコリンで刺激するとウイルスが再活性化されることを報告している。この知見を元に再活性化時に潜伏感染器官において起こる変化を経時的に追跡することを試みようとした。しかし豚を試験動物として使用した場合、施設面及び労力の問題で使用頭数が限られる。幸いにして我々はマウスによる潜伏感染モデルの可能性を示唆するデータを得ていたため、実験動物としてマウスを用いることとした。まずマウスにおける感染モデルの確立を目的とした。マウスは抗オーエスキー病豚血清で前処置した後、10〜10^3LD_<50>相当のオーエスキー病ウイルス野外株で攻撃した。大半が生残したので攻撃1及び2カ月後に数例から三叉神経節を取り出し、ウイルス糖蛋白gGをコードする遺伝子を指標としてPCRを行った。その結果、ほぼ全例でウイルス遺伝子が検出された。また、これらの神経節をアセチルコリンで刺激することによって培養4〜6日にウイルスが再活性化することも確認された。次にこの系を用いてアセチルコリン刺激下における蛋白の変動について検討した。潜伏感染マウスより取り出した三叉神経節をアセチルコリンで刺激し、培養開始から6日目まで毎日細胞を採取してSDS-PAGEにより分析した。その結果、培養3日目以降に消失する、おそらく宿主由来の約30KDの蛋白の存在が確認された。今後はこの蛋白の消失がウイルスの再活性化に関与しているかどうかを確認するため、コード遺伝子の検索とin vitro発現系における蛋白発現を行う予定である。なお、アセチルコリン刺激下でのRNAの変動については今回検討する余裕を持てなかったため、これも併せて今後の検討課題としたい。

We report the presence of a latent infection in the brain. This knowledge is reactivated when latent infection occurs. The number of test animals is limited to the number of test animals used, the number of test animals used, and the number of test animals used. We're going to have to wait until we get there. The purpose of the infection After treatment with anti-Oraeuskiye pig serum, 10 ~ 10^3LD_<50>equivalent to Oraeuskiye iluskiye wild strains were attacked. Most of the attacks occurred 1 and 2 months later, and several cases of trifurcation were detected, including the detection of glycoprotein G and PCR. The results of the survey are as follows: After 4 to 6 days of incubation, the cells were reactivated. The second is to detect the changes in protein under the stimulation of the enzyme. Latent infection was detected by SDS-PAGE. The results showed that the protein disappeared after 3 days of culture, and the presence of about 30KD protein from the host was confirmed. In the future, the reactivation of the protein will be confirmed, and the detection of the protein will be determined in vitro. The RNA activity under the stimulation of the virus was investigated in the future.