胃癌と腸上皮化生で増加するユビキチンの性状とその動態の解析

胃癌和肠化生中泛素增加的特性和动态分析

• 批准号: 08877206
• 负责人: 守屋 祐介
• 金额: $ 0.96万
• 依托单位: Jikei University School of Medicine
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 1996
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1996 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-08877206/
• 关键词: ユビキチン; 胃癌; 腸上皮化生

胃癌、腸上皮化生に蓄積したユビキチンの解析を行うためマルチユビキチン鎖-蛋白結合体(multi-ubiquitin chain)、遊離型ユビキチン(free ubiquitin)の動態を検討し、以下の実験結果、成果を認めた。1.試料のサンプリング手術検体の一部、内視鏡検査下での生検材料を患者の承諾の上、胃癌、腸上皮化生、正状粘膜、各10検体をサンプリングした。この試料をTris緩衝液で抽出し、易溶性画分を、不溶性成分を8M尿素で可溶化し、難溶性画分を各々調製した。2.multi-ubiquitin chain(MUb)、free ubiquitin(FUb)の測定MUb ELISA,FUb RIAの二種類のイムノアッセイ系を用いて、それぞれの分画を測定した。MUbは、難溶性画分において正常粘膜に比べ胃癌で増加していた。またFUbは、正常粘膜に比べ胃癌では、有意な変化は認められなかったが、腸上皮化生において増加を認めた。したがって、免疫組織化学の手法で指摘された胃癌組織中のユビキチンの増加は、難溶性画分で癌特有のユビキチン化蛋白質の蓄積を反映するものと考えられた。また、腸上皮化生で増加しユビキチンは、遊離型ユビキチンと考えられた。このことは、発癌の機序の上でユビキチン系が重要な要素である可能性を示唆しているものと思われた。3.現在進行中の研究現在、胃癌と正常粘膜において3種類のユビキチン遺伝子(UbA,UbB,UbC)のm-RNAの発現をnorthern blot法により解析している。その他、免疫組織化学的手法にて、MUb、FUbの細胞局在を検討している。

The dynamic analysis of multi-ubiquitin chain and free ubiquitin in gastric cancer and intestinal metaplasia was discussed. The results and achievements were summarized as follows. 1. A part of the surgical specimen, a part of the biopsy specimen under endoscopic examination, a part of the patient's commitment, a part of the gastric carcinoma, a part of the intestinal metaplasia, a part of the normal mucosa, and a part of the patient's commitment. The sample was extracted from Tris buffer, soluble in water, insoluble in urea, soluble in water, insoluble in water. 2.Multi-ubiquitin chain(MUb), free ubiquitin(FUb) determination MUb ELISA,FUb RIA of two kinds of different types of detection system for use in the middle, all kinds of detection. MUb is insoluble in normal mucosa and increased compared with gastric cancer. Normal mucosa is more sensitive to gastric cancer than intestinal metaplasia. Immunohistochemical method was used to detect the increase of tumor cells in gastric cancer tissues, and the accumulation of cancer-specific tumor cells in gastric cancer tissues. Intestinal metaplasia, intestinal metaplasia The mechanism of cancer development is an important factor in the development of cancer. 3. The m-RNA expression of three kinds of genes (UbA,UbB,UbC) in gastric cancer and normal mucosa was analyzed by northern blot method. In addition, immunohistochemical methods, MUb, FUb and cellular functions are also discussed.