新規がん抑制遺伝子の機能解析から解き明かすテロメレース発現制御ネットワーク

通过新型肿瘤抑制基因的功能分析揭示端粒酶表达调控网络

• 批准号: 13J06643
• 负责人: 大平 崇人
• 金额: $ 1.28万
• 依托单位: Tottori University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2013
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2013-04-01 至 2015-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-13J06643/
• 关键词: テロメレース; メラノーマ; microRNA; がん; がん抑制遺伝子; TERT; PITX1

申請者らは, ヒトテロメレース逆転写酵素遺伝子hTERTの内在性の抑制遺伝子としてPITX1を同定した. さらに, 昨年度までの研究成果より, PITX1に結合し複合体を形成する新規のX遺伝子の発見と, さらにPITX1の発現を負に制御する新規microRNA(miRNA)としてmiR-19bを同定した.本年度は①PIXT1-X遺伝子複合体の詳細な機能解析と②ES細胞におけるPITX1の発現動態解析および③miR-19bによるPITX1抑制効果とメラノーマ発生との関連性について検討を行った.　その結果, 実験①からは, PITX1とX遺伝子を一過性に共発現させたヒトメラノーマ細胞株A2058において, PITX1単独の発現実験と比べて, さらに高いTERTの抑制効果が認めた. また, 実験②では未分化細胞(ES・iPS細胞)を神経細胞へと分化させて, その過程におけるhTERTとPITX1の発現動態解析を行ったところ, 未分化状態のES・iPS細胞ではhTERTの発現は高く, PITX1の発現はほとんど認められた. 一方, 神経分化誘導細胞においてはhTERTの発現低下とPITX1の顕著な発現上昇が確認された. 加えて, 実験③からPITX1の発現を制御するmicroRNAとしてmiR-19bを同定した. メラノーマ細胞株A2058におけるmiR-19bのノックダウンはPITX1の発現上昇を誘導し、さらにhTERT抑制効果が認められた(Ohira T et al, Scientific Reports : online, DOI:10.1038/srep08201, 2015).以上の結果から, hTERTの発現を正に制御するmiR-19bと負に制御するPIXT1-X遺伝子複合体の存在を同定し, 新たなテロメレース制御の分子経路の存在を明らかにした.

The applicant is determined by the intrinsic inhibition gene of hTERT and PITX1. In addition, the research results of last year showed that the new gene expression of PITX1 binding complex was discovered, and the new microRNA(miRNA) and miR-19b were also determined. This year, we conducted a detailed functional analysis of PIXT1-X gene complex, a dynamic analysis of PITX1 development in ES cells, and a study of the inhibitory effects of miR-19b on PITX1 development. The results showed that PITX1 and X genes were transiently co-expressed in cell line A2058, and PITX1 alone was independently expressed in cell line A2058. The expression of hTERT and PITX1 in undifferentiated ES·iPS cells was analyzed dynamically during the differentiation process. On the other hand, it was confirmed that the expression of hTERT was decreased and the expression of PITX1 was increased in cells induced by neural differentiation. In addition, microRNA and miR-19b are also identified in the control of PITX1 expression. The expression of miR-19b in cell line A2058 was induced and hTERT was inhibited (Ohira T et al, Scientific Reports : online, DOI:10.1038/srep08201, 2015). As a result, hTERT expression is positively controlled by miR-19b and negatively controlled by PIXT1-X gene complex.

项目成果

染色体工学技術によるテロメレース抑制遺伝子の単離

利用染色体工程技术分离端粒酶抑制基因

• 发表时间: 2014
• 作者: Osaki M;Chinen H;Ybshida Y;Ohhira T;Sunamura N;Yamamoto O;Ito H;Oshimura M;Kugoh H.;大沼進・長坂邦仁・佐藤浩輔・北梶陽子・吉田悠一郎;渡辺周;小西信義・安達聖・大宮哲・佐藤浩輔・村上智彦;大平 崇人;渡辺周;大平 崇人
• 通讯作者: 大平 崇人

miR-19B regulates hTERT expression through targeting PITX1 in melanoma cells

miR-19B 通过靶向黑色素瘤细胞中的 PITX1 调节 hTERT 表达

• 发表时间: 2014
• 作者: Osaki M;Chinen H;Ybshida Y;Ohhira T;Sunamura N;Yamamoto O;Ito H;Oshimura M;Kugoh H.;大沼進・長坂邦仁・佐藤浩輔・北梶陽子・吉田悠一郎;渡辺周;小西信義・安達聖・大宮哲・佐藤浩輔・村上智彦;大平 崇人
• 通讯作者: 大平 崇人