Der Beitrag von Mikrogliazellen an der Pathogenese von Prionen-Erkrankungen

小胶质细胞对朊病毒疾病发病机制的贡献

• 批准号: 5186916
• 负责人: Professor Dr. Frank Heppner
• 金额: --
• 依托单位: Institut für Neuropathologie (CCM)
• 依托单位国家: 德国
• 项目类别: Research Fellowships
• 财政年份: 1999
• 资助国家: 德国
• 起止时间: 1998-12-31 至 2001-12-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://gepris.dfg.de/gepris/projekt/5186916?language=en
• 关键词: Der; Beitrag; von; Mikrogliazellen; der

Das angestrebte Projekt versucht den Beitrag von Mikrogliazellen sowohl an der Neurotoxizität als auch an der Ausbreitung von Prionen im Rahmen von spongiformen Enzephalopathien zu erforschen. Dazu sollen gentechnologische Methoden (transgene und knock-out Mäuse), Zellkultur und neuronale Transplantation kombiniert zum Einsatz kommen. Um die Rolle des in Mikrogliazellen physiologisch vorkommenden Prion Proteins PrPc zu untersuchen, werden neuronale Transplantate, die aus PrP+Mikroglia (aus transgenen tg20 Mäusen, die PrPc überexprimieren) und PrP-Neuronen (aus transgenen Prnp0/0-Mäusen, denen das PrPc fehlt) bestehen (bzw. vice versa) mit RML-Prionen infiziert und analysiert. Weiterhin ist geplant, transgene Prnp0/0-Mäuse mit Mikroglia-spezifischer PrP-Expression unter Steuerung eines Makrophagen/Mikroglia-spezifischen CD11b-Promoters (CD11b-PrP) zu generieren, mit RML-Prionen zu infizieren und zu analysieren. Auf ähnliche Weise werden wir CD11b-PrP-Mikroglia in Prnp0/0-Mäusehirne transplantieren, diese Transplantate infizieren und untersuchen. Um die potentielle Neurotoxizität von aktivierten Mikrogliazellen, die sich im Rahmen von spongiformen Enzephalopathien im Bereich des pathologischen Gewebes anreichern, zu klären, planen wir eine transgene Maus zu generieren, in der die Ablation von Mikrogliazellen zu einem definierbaren Zeitraum möglich ist. Das zugrundeliegende Konstrukt wird aus der kodierenden Region für die Herpes simplex VirusThymidin Kinase (HSV-TK) bestehen, das vom Makrophagen/Mikroglia-spezifischen CD11b-Promoter gesteuert wird. Nach Applikation des Zytostatikums Ganciclovir (GCV) wird HSV-TK zu einem toxischem Produkt umgewandelt, das die DNS-Replikation in proliferierenden Zellen blockiert. Auf diese Weise planen wir Mikrogliazellen von CD11b-HSV-TK transgenen Mäusen durch Ganciclovir zu eliminieren, bei letalem Ausgang mit einer Knochenmarks-Transplantation zu rekonstituieren, um dann diese transgenen Tiere anschließend mit RML Prionen zu infizieren und bezüglich der neurotoxischen Effekte und PrPSc-Akkumulation zu untersuchen. Ein Teil der Vorarbeiten, wie z.B. das Erstellen des HSV-TK Konstrukts, wird bereits in Professor Aguzzi's Gruppe geleistet. Desweiteren ist der Zugriff auf transgene und knock-out Mäuse gewährleistet.

该项目的主要目的是研究脑胶质细胞瘤的神经毒性，以及脑胶质细胞瘤海绵状病变的神经毒性。因此，我们必须采用基因工程方法（转基因和基因敲除）、细胞培养和神经元移植相结合的方法来实现这一目标。PrPc在微胶质细胞生理学中的作用是研究PrPc在韦尔登细胞移植中的作用，包括PrP+微胶质细胞（来自于转基因的Prnp 0/0-Mäusen，即PrPc受体）和PrP-Neuronen（来自于转基因的Prnp 0/0-Mäusen，即PrPc受体）。反之亦然）mit RML-Prionen infiziert und analysiert.此外，转基因Prnp 0/0-Mäuse mit Mikroglia-spezifischer PrP-Expression unter Steuerung eines Makrophagen/Mikroglia-spezifischen CD11b-Promoters（CD11b-PrP）zu genereren，mit RML-Prionen zu infizieren and zu analysieren。在Prnp 0/0-Mäusehirne移植中，我们韦尔登使用CD 11 b-PrP-Mikroglia，使移植物感染并存活。在神经毒性的潜在作用中，神经胶质细胞活化，这一作用是由海绵状脑病引起的，这种海绵状脑病是由病理学上的Gewebes引起的，因此，我们计划将一种转基因Maus zu generieren，用于微胶质细胞的消融，从而形成一个明确的Zeitraum möglich。单纯疱疹病毒胸苷激酶（HSV-TK）基因的启动子主要来自巨噬细胞/小胶质细胞特异性CD 11b启动子。随后，更昔洛韦（GCV）将HSV-TK应用于一种毒理学产品，以在增殖性细胞中进行DNS标记。本研究计划通过更昔洛韦清除CD 11 b-HSV-TK转基因小鼠，并通过一个Knochenmarks-Transplantation重建，然后用RML Prionen进行转基因小鼠的移植，观察其神经毒性效应和PrPSc-激动作用。这是一个前苏联时期的故事。HSV-TK结构的初步研究将在Aguzzi教授的研究小组中进行。Zugriff的去weiteren是转基因和敲除Mäuse的产物。