環境中での薬剤耐性菌の制御に向けた，原生生物のバイオフィルム捕食作用の評価

原生生物生物膜捕食控制环境耐药菌效果评价

• 批准号: 22K12404
• 负责人: 小林 由紀
• 金额: $ 2.66万
• 依托单位: Yamaguchi University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2022
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2022-04-01 至 2025-03-31
• 项目状态: 未结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-22K12404/
• 关键词: 薬剤耐性菌; 原生生物; ESBL産生菌; Paramecium; ゾウリムシ; 捕食; バイオフィルム; ワンヘルス

【背景・目的】薬剤耐性菌は世界的に重要視されている公衆衛生上の問題の一つである. 薬剤耐性菌を減らす方法として，本研究では,環境に負荷を与えない 微生物ループの視点から，細菌の捕食者である原生生物を用いた捕食による薬剤耐性菌除去に着目した.【方法】2種の繊毛虫 (Paramecium caudatum dCRT14b, Paramecium multimicronucleatum Y-2) と3種のESBL産生菌を用いて, ESBL産生菌に対する繊毛虫の捕食能力, 消化能力を評価した. さらに, 温度が捕食能力, 消化能力に影響を与えるか検証した.【結果】2種のParameciumの捕食率は, 24時間後に全ての菌で90%を超えており, 捕食効果を確認した. Parameciumの食胞内での消化を評価するため, 2種のParameciumのGFP含有食胞のLysoTracker陽性率を比較した結果, 2種ともに消化が確認され, 陽性率はP. multimicronucleatum Y-2のほうがP. caudatum dCRT14bよりも高値を示した. Parameciumから排出された薬剤耐性遺伝子を検出するため, 細胞外DNAをリアルタイムPCRで解析した結果, 薬剤耐性遺伝子CTX-M-15の相対値は, P. multimicronucleatum Y-2では非存在群に比べて有意な減少を認めた. しかし, P. caudatum dCRT14bでは, 培養1日目の存在群において, 非存在群に比べ相対値が増加していた.【考察】2種のParameciumはESBL産生菌を捕食消化することを明らかにした. さらに, P. multimicronucleatum Y-2は薬剤耐性菌だけでなく, 薬剤耐性遺伝子まで効率よく消化することも示された.

Background Objective: Resistant bacteria are an important concern of the world. Methods for reducing resistant bacteria were studied in this study, which focused on environmental load and microbial species, bacteria and predators, and the elimination of resistant bacteria. [Methods] Two species of caterpillars (Paramecium caudatum dCRT14b, Paramecium multimicronucleatum Y-2) and three species of ESBL producing bacteria were used in the experiment. Today, temperature affects predation ability and digestion ability. [Results] Predation rate of 2 species of Paramecium was 90% after 24 hours, predation fruit was confirmed. The positive rate of LysoTracker in two kinds of Paramecium and GFP containing phagocytes was compared. The positive rate of LysoTracker in two kinds of Paramecium was confirmed. multimicronucleatum Y-2のほうがP. caudatum dCRT14b Paramecium is the most resistant gene to be detected in vitro. Extracellular DNA is analyzed by PCR. The relative value of resistant gene CTX-M-15, P. multimicronucleatum Y-2, is not found in this study. P. caudatum dCRT14b was cultured for 1 day, and the values of non-existent groups were increased compared with those of non-existent groups. [Investigation] 2 species of Paramecium and ESBL producing bacteria predation digestion. In addition, P. multimicronucleatum Y-2 is resistant to the presence of resistant bacteria, and resistant to the presence of resistant bacteria.

项目成果

Evaluation of predation by protists Paramecium on antimicrobial resistant bacteria

原生生物草履虫对抗菌药物耐药菌的捕食评价

• 发表时间: 2023
• 作者: Yuka Tanaka;Mio Tsurui; Yuki Kobayashi;Kenta Watanabe;Masahisa Watarai
• 通讯作者: Masahisa Watarai

The bactericidal effect of far-UVC on ESBL-producing Escherichia coli

远紫外线对产ESBL大肠杆菌的杀菌作用

• 发表时间: 2022
• 作者: Yuki Kobayashi;Jun Nishikawa;Soichiro Fukuda;Yumi Okabe;Tomohiro Fujii;Naoto Kubota;Yuka Tanaka;Mio Tsurui;Ken-Ichiro Otsuyama;Hidehiro Tsuneoka
• 通讯作者: Hidehiro Tsuneoka

Antimicrobial resistant bacteria in the aquatic environments

水生环境中的抗菌药物耐药细菌

• 发表时间: 2022
• 作者: Yuki Kobayashi;Jun Nishikawa;Soichiro Fukuda;Yumi Okabe;Tomohiro Fujii;Naoto Kubota;Yuka Tanaka;Mio Tsurui;Ken-Ichiro Otsuyama;Hidehiro Tsuneoka;Yuki Kobayashi
• 通讯作者: Yuki Kobayashi