Die Proteom-Dynamik von Assemblierungs- und Regulationsprozessen des Photosystem I Komplexes und seiner Lichtsammlerproteine im Chloroplasten der Grünalge Chlamydomonas reinhardtii

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Zur Analyse der Dynamik von Assemblierungsprozessen des plastidären photosynthetischen Apparates sollen Genetik und Proteomics an der Grünalge Chlamydomonas reinhardtii kombiniert werden. Das Ziel soll die Identifizierung neuer Proteinfaktoren sein, die in den Assemblierungsprozessen der Photosysteme I und II sowie der Lichtsammlerproteinen (LHCP) eine funktionelle Rolle spielen. Mutanten, die Assemblierungsdefekte in den LHCP aufweisen, sollen als lichtresistente Suppressoren der PsaFMinusmutante durch Insertionsmutagenese isoliert werden. Durch Rückisolierung des mutagenisierenden Plasmids kann das betroffene C. reinhardtii identifiziert werden. Im Proteomicteil sollen Thylakoide über hochauflösende zwei-dimensionale Gelelektrophorese (2-DG) aufgetrennt werden, um interessante Spots über massenspektroskopische Methoden (MS) zu identifizieren. Mit dieser methodischen Kombination sollen Thylakoide der PSIAssemblierungsmutante ycf4 analysiert werden, um im Vergleich mit entsprechenden Kontrollen andere Faktoren des ycf4-Multiproteinkomplexes zu identifizieren. Die y1-Mutante von C.reinhardtii, unfähig zur Dunkelsynthese von Chlorophyll, stellt ein ideales Modellsystem zur Analyse der lichtinduzierten Assemblierung der Photosysteme I/II dar. Proteine, die lichtinduziert vor diesen Komplexen in der Thylakoidmembran von y1 akkumulieren und damit als Assemblierungswerkzeuge dienen könnten, sollen über 2-DG und MS identifiziert werden.