非A非B型肝炎における肝グアナーゼの免疫組織化学的研究

非甲非乙型肝炎中肝胍酶的免疫组织化学研究

• 批准号: 61570344
• 负责人: 伊東 進
• 金额: $ 0.9万
• 依托单位: The University of Tokushima
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
• 财政年份: 1986
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1986 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-61570344/
• 关键词: グアナーゼ; 組織化学; 細胞化学; 免疫組織化学; 非A非B型肝炎; 輸血後肝炎

我々はグアナーゼ(GU)活性の高い輸血血液を廃棄することにより非A非B型輸血後肝炎の発生を予防出来ることを明らかにした(Hepatology6:993,1986,日消会誌83:2266,1986)。本研究においてはGUに特異性が強く、一般臨床検査として利用可能なGUの免疫組織化学的染色法を確立するため、ヒト肝よりGUを精製分離し、家兎免疫後、抗体を採取し、GUの免疫組織化学的染色法を確立した。まず、ヒト肝抽出液を作成し、上清の硫安40〜70%分画を採取し、脱塩後DE-52カラムクロマト、Hydroxyapatiteカラムクロマト、UItrogel ACA-34カラムクロマト、ゲル液体クロマト(TSK3000SW)およびイオン交換液体クロマト(TSKgelDEAE-3SW)に順次かけ、ヒト肝GUを精製分離する。精製分離されたヒト肝GUを抗原とし、家兎を免疫し、GU抗体を作成した(日消会誌82:1805,1985)。採取されたヒト肝GU抗体を用い、マレーミド法によるPeroxidase標識抗体を作成し(石川法)、GUの免疫組織化学的染色法を確立した(Clini Chim Acta投稿中)。さらに、本法およびNBT法を用い、ヒト肝およびその他の組織におけるGUの分布を明らかにし、種々肝疾患におけるGUの組織内分布の特異性を明らかにした。(Acta Histochem Cytochem 19:437,1986,日消会誌84:(4)掲載予定)。最近、電子密度を有する反応物質を生成するテトラゾリウム化合物(yellow tetrazolium(YT)が合成されており、NBTの変りにTYを用いた新しいGUの電顕的(細胞化学的)証明法をも確立した。(Acta Histochem投稿中)。以上の光顕的および電顕的GU証明法を用い、さらに症例を重ね、非A非B型肝炎の病態と肝GUの関係を明らかにし、GUの組織化学的証明法を非A非B型肝炎の診断の1つとして確立することを目的として、さらに本研究を続けたい。

The development of non-A, non-B post-transfusion hepatitis should be prevented if the activity of GU is high (Hepatology6:993, 1986, Journal of the Japanese Consumer Association 83:2266, 1986). In this study, the specificity of GU was determined by immunohistochemical staining of GU and GU was purified and isolated. After immunization, antibodies were collected and GU was established by immunohistochemical staining. To prepare the crude and crude liver extract, extract 40 ~ 70% of the supernatant sulfur amine, purify and separate the crude liver GU after purification by DE-52, Hydroxyapatite, UItrogel ACA-34, Liquid (TSK3000SW) and Liquid Exchange (TSKgelDEAE-3SW). Purification of GU antigen, immunization, and GU antibody (Journal of the Japanese Academy 82:1805, 1985) The use of anti-GU antibodies in the liver, the preparation of antibodies labeled with Peroxidase (Ishikawa method), and the establishment of GU by immunohistochemical staining (Clini Chim Acta submission) The distribution of GU in other tissues is clearly demonstrated by the application of this method and the NBT method. (Acta Histochem Cytochem 19:437, 1986, Sun Xiao Hui Zhi 84:(4) Rev. Recently, the electron density of the reaction substance production process has been established for the synthesis of yellow tetrazolium(YT), NBT and TY. (Acta Histochem submission). This study aims to establish the diagnosis of non-A, non-B hepatitis by using the above methods of light and electricity to prove the relationship between liver GU and non-A, non-B hepatitis.

项目成果

伊東進: メディヤサークル. 31. 235-245 (1986)

伊藤进：媒体圈。31. 235-245 (1986)

Susumu ITO et al: Hepatology. 6. 990-993 (1986)

Susumu ITO 等：肝病学。

Susumu ITO et al: Acta Histochem Cytochem.19. 437-449 (1986)

Susumu ITO 等人：Acta Histochem Cytochem.19。

伊東進: 臨床と研究. 63. 2576-2582 (1986)

伊藤进：临床与研究 63。2576-2582 (1986)

伊東進 他: 日消会誌. 83. 2266 (1986)

Susumu Ito 等人：《日作会杂志》，83. 2266 (1986)。