ヒマ種子レクチンの糖結合部位構造に関する研究

蓖麻籽凝集素糖结合位点结构的研究

• 批准号: 61580147
• 负责人: 山崎 信行
• 金额: $ 1.15万
• 依托单位: Kyushu University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
• 财政年份: 1986
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1986 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-61580147/
• 关键词: ヒマ種子レクチン; リシンD; リシンE; ヘムアグルチニン; 糖結合部位構造; カルボキシル基; ヒスチジン残基; 糖認識機構

本研究は三種のヒマ種子レクチンについてそれぞれ糖結合部位構造を明らかにしようとしたものである。まず、東南アジア産ヒマ種子より得たリシDについて検討し、このレクチンはカルボキシル基を化学修飾すると細胞凝集能を消失することを認めた。 分光学的手法および親和性クロマトグラフィーによる解析結果から、この細胞凝集能の消失はリシンDの2つの糖結合部位のうち高親和性部位における糖結合能の消失によることが明らかとなった。 また、カルボキシペプチダーゼYによるリシンD-B鎖の消化実験の結果からB鎖のC-末端部位にある6個のアミノ酸残基は高親和性部位の構造形成に関与していることが示唆された。 一方、リシンDのイソレクチンであるヘムアグルチニン(CBH)の恬性発現にはヒスチジン残基が関与することを見い出し、ケイ光ラベル剤を用いて詳細に検討し、CBHのB鎖の248位のヒスチジン残基はガラクトピラノシド認識部位に存在することおよび251位のヒスチジン残基はオリゴ糖との結合に際してサブサイト相互作用を行う上で重要な働きをすることが判明した。 ついで日本産ヒマ種子から得たリシンEについても検討し、このレクチンは上記東南アジア産ヒマ種子のレクチンとは異なりグアルガム凝集能を欠くことを見い出し、リシンEはリシンDやCBHとは糖認識機構を異にすることを示唆した。 さらに分光学的解析結果と透析平衡法による実験結果から、このレクチンはリシンDと同様に2つの糖結合部位を有するが高親和性部位における糖結合能はリシンDのそれに比べて低く、また構造も異なることを明らかにした。 また化学修飾の結果からリシンE-B鎖の高親和性部位にはヒスチジン残基が存在し、この残基はB鎖の248位または251位のヒスチジンであることを明らかにし、この部位はCBHの糖結合部位構造と相似することが判明した。

This study は three の ヒ マ seed レ ク チ ン に つ い て そ れ ぞ れ combined parts structure を Ming ら か に し よ う と し た も の で あ る. ま ず, southeast ア ジ ア production ヒ マ seed よ り have た リ シ D に つ い て beg し, 検 こ の レ ク チ ン は カ ル ボ キ シ ル base を chemically modified す る と cells agglutinate can disappear を す る こ と を recognize め た. Spectroscopy technique お よ び affinity ク ロ マ ト グ ラ フ ィ ー に よ る analytical results か ら, こ の cells agglutinate can disappear の は リ シ ン の 2 D つ の combined parts の う ち high-affinity parts に お け る sugar binding energy の disappear に よ る こ と が Ming ら か と な っ た. ま た, カ ル ボ キ シ ペ プ チ ダ ー ゼ Y に よ る リ シ ン D - B lock の digestion be 験 の results か ら lock の B C - end parts に あ る six の ア ミ ノ acid residues は high-affinity parts の に structure formation masato and し て い る こ と が in stopping さ れ た. Party, リ シ ン D の イ ソ レ ク チ ン で あ る ヘ ム ア グ ル チ ニ ン (CBH) の tian 発 now に は ヒ ス チ ジ ン residues が masato and す る こ と を see い し, ケ イ light ラ ベ ル tonic を い て detailed に beg し 検, CBH の B lock の 248 の ヒ ス チ ジ ン residues は ガ ラ ク ト ピ ラ ノ シ ド recognize parts に す る こ と お よ び 25 One の ヒ ス チ ジ ン residues は オ リ ゴ sugar と の combining に interstate し て サ ブ サ イ ト interaction line を う で important な 働 き を す る こ と が.at し た. つ い で Japanese ヒ マ seed か ら have た リ シ ン E に つ い て も beg し 検, こ の レ ク チ ン は written southeast ア ジ ア production ヒ マ seed の レ ク チ ン と は different な り グ ア ル ガ ム can agglutinate を owe く こ と を see い し, リ シ ン E は リ シ ン D や CBH と は sugar know institutions を different に す る こ と を in stopping し た. さ ら に spectroscopy analytical results と equilibrium dialysis method に よ る be 験 results か ら, こ の レ ク チ ン は リ シ ン D と with others に 2 つ の combined sites す を る が high-affinity parts に お け る sugar binding energy は リ シ ン D の そ れ に than べ て low く, ま た も different structures な る こ と を Ming ら か に し た. ま た chemically modified の results か ら リ シ ン E - B lock の high-affinity parts に は ヒ ス チ ジ ン residues が し, こ の residues は B lock の 248 ま た は 251 の ヒ ス チ ジ ン で あ る こ と を Ming ら か に し, こ の parts は CBH の と combined parts structure similar す る こ と が.at し た.

项目成果

Tomomitsu Hatakeyama;Nobuyuki Yamasaki;Gunki Funatsu: J.Biochem.100. 781-788 (1986)

Tomomitsu Hatakeyama；Nobuyuki Yamasaki；Gunki Funatsu：J.Biochem.100。

Nobuyuki Yamasaki;Nural Absar;Gunki Funatsu: J.Biochem.101. 763-768 (1987)

Nobuyuki Yamasaki；Nural Absar；Gunki Funatsu：J.Biochem.101。

Tomomitsu Hatakeyama;Nobuyuki Yamasaki;Gunki Funatsu: J.Biochem.99. 1049-1056 (1986)

Tomomitsu Hatakeyama；Nobuyuki Yamasaki；Gunki Funatsu：J.Biochem.99。

Nural Absar;Nobuyuki Yamasaki;Gunki Funatsu: J.Biochem.99. 1057-1062 (1986)

Nural Absar；Nobuyuki Yamasaki；Gunki Funatsu：J.Biochem.99。

Nural Absar;Nobuyuki Yamasaki;Gunki Funatsu: Agric.Biol.Chem.50. 3071-3076 (1986)

Nural Absar；Nobuyuki Yamasaki；Gunki Funatsu：Agric.Biol.Chem.50。