アルキル化DNA修復欠損株を用いたDNA修復及び突然変異機構の解析

使用烷基化 DNA 修复缺陷菌株分析 DNA 修复和突变机制

• 批准号: 63015108
• 负责人: 石田 良司
• 金额: $ 1.34万
• 依托单位: Aichi Cancer Center Research Institute
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Cancer Research
• 财政年份: 1988
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1988 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-63015108/
• 关键词: O^6-メチルグアニン; 突然変異; O^6-メチルグアニンDNAメチルトランスフェラーゼ; ACNU耐性HeLaS3細胞; ニトロソグアニジン; 細胞致死; 自然突然変異率

研究計画にそって成果をまとめた。1.O^6-メチルグアニンと突然変異の生起ニトロソグアニジン(MNNG)耐性HeLaS_3細胞(MR10-1)よりニトロソウレア誘導体であるACNUに抵抗性細胞(AC^r41、AC^r42)を分離した。これらのAC^r細胞はO^6-メチルグアニンDNAメチルトランスフェラーゼ(MT)活性が回復していた。AC^r細胞と親株のMNNGによる6-チオグアニン及びウワバイン耐性細胞の出現頻度を比較して、AC^r細胞が突然変異誘発に抵抗性があることがわかった。2.O^6-メチルグアニン以外の細胞死に関係するアルキル化塩基の同定大腸菌のalkA遺伝子を動物細胞用発現ベクター(p500)に組込み、リン酸カルシウム沈殿法でBHK細胞に導入する事ができた。現在ヒト培養細胞にエレクトロポレーシンでalkAの導入を試みている。3.O^6-メチルグアニンと細胞死の関連HeLaS3Mer^-細胞からACNUに抵抗性細胞を分離した。AC^r細胞はMT活性が著明に増加していた。このAC^r細胞は親株に比し、MNNGによる致死に抵抗性であった。MR10-1細胞のMNNG耐性機構MNNG耐性細胞、MR株の中に、自然突然変異率の高い細胞(MR10-1、MR1-3)と親株(HeLaS3Mer^-)と変わらない細胞の二種の細胞が存在していた。前者の細胞株は6-メチルメルカプトプリン及び6-メチルメルカプトプリンリボシッドに親株に比し抵抗性であった。1、3の成果からO^6-メチルグアニンがMNNGによる突然変異及び細胞致死に関係していることが強く示唆された。今後、O^6-メチルグアニンと発がんとの関係、MR10-1及びMR1-3を用いての自然突然変異のメカニズムの解明をおこなう計画である。

The result of the research project is the same. 1.O^6-メチルグアニンとsudden change of ニトロソグアニジン (MNNG) resistant HeLaS_3 cells (MR 10-1) Isolation of よりニトロソウレア inducer であるACNU resistance cells (AC^r41, AC^r42).これらのAC^rcellはO^6-メチルグアニンDNAメチルトランスフェラーゼ(MT)ACTIVITYがRESPAIRしていた. AC^r cells are the parent strain of MNNG による6-チオグアニン and びウワバイン resistant cells. The frequency of occurrence is comparative, AC^r cells are suddenly changed, and resistance is induced. 2.O^6-メチチルグアニン の 性 に す る ア ル キ ル 桩 Basic の Same as coliform の alkA 伝子 を animal The cells were introduced into the cells using 発成ベクター(p500)に组込み, リン acid カルシウムShendian method and BHK cells. Now the cultured cells of ヒエレクトロポレーシンでalkAの are introduced and tested みている. 3.O^6-メチルグアニンとassociated with cell death HeLaS3Mer^-cell and ACNU resistant cell isolated. The activity of MT in AC^r cells has been shown to increase.このAC^r cells are better than the parent strain, and MNNG is lethal and resistant. MNNG resistance mechanism of MR10-1 cells, MNNG resistant cells, MR strain, high natural mutation rate cells (MR10-1, MR1-3), parent strain (HeLaS3Mer^-), and two kinds of cells exist. The former cell lines are は6-メチルメルカプトプリン and び6-メチルThe メルカプトプリンリボシッドにparent strain に比しresistant であった. 1. The result of 3 is the result of O^6-メチルグアニンがMNNG sudden mutation and the relationship between cell death and death. From now on, O^6-メチルグアニンと発がんとの relations, MR10-1 and びMR 1-3を Use the natural sudden change of the nature and the interpretation of the plan.

项目成果

Ryoji,Ishida: Somatic Cell Mol.Genet.14. 489-498 (1988)

Ryoji，Ishida：体细胞分子遗传学.14。