Phänotypische und funktionelle Analysen von murinen NTE/sws Mutanten

有机磷酸盐组（OPs）的酯酶抑制剂被称为Ursache einer verzögerten sensomotorischen Neuropathie bekannt（“有机磷酸盐诱导的迟发性神经病，OPIDN”）。Das vor kurzem isolierte molekulare Target，the human Neuropathy-Target-Esterase（NTE），erwies sich als homologous Protein des Drosophila Neurodegenerationsgens swiss-cheese（sws）.我们观察了小鼠NTE/sws-Gen在胚胎发育过程中的表达，发现了上皮细胞的分化和中枢和外周神经系统的结构特点。在体内研究酯酶在神经元结构差异和完整性方面的功能时，我们已经敲除了一种结构，并在随后的工作中发现了这种结构，主要是通过NTE/sws空突变来实现的。在此基础上，研究者提出了一个新的研究课题，即Mäusen中枢神经系统和外周神经系统的发展和差异。丹麦人在莱斯特（英国）与保罗·格林的团队合作，使他们对韦尔登的行动感到敏感。本文通过对NTE/sws蛋白在膜细胞中的作用的初步实验，从胚胎神经元分化的角度研究了神经元的分化，并利用膜片钳技术对野生型韦尔登的神经元的分化进行了初步的研究。在一个神经再生实验模型中，神经再生在NTE/sws-缺失和未被发现的情况下，在与Gerhard Giegerich的合作中，研究了NTE/sws突变的影响，以及自身免疫性脑炎（EAE）的实验模型。

Bestimmte Esteraseinhibitoren aus der Gruppe der Organophosphate (OPs) sind seit langem als Ursache einer verzögerten sensomotorischen Neuropathie bekannt ("organophosphate-induced delayed neuropathy, OPIDN"). Das vor kurzem isolierte molekulare Target, die humane Neuropathy-Target-Esterase (NTE), erwies sich als homologes Protein des Drosophila Neurodegenerationsgens swiss-cheese (sws). Wir haben daher das murine NTE/sws-Gen isoliert und spezifische Expressionsmuster im Verlauf der embryonalen Entwicklung verschiedener epithelialer Geweben und Strukturen des zentralen und peripheren Nervensystems charakterisiert. Um die Funktion der Esterase im Rahmen der Differenzierung und Integrität neuronaler Strukturen in vivo zu untersuchen, haben wir ein knock-out Konstrukt hergestellt und sind in gegenwärtigen Arbeiten dabei, Mausstämme mit NTE/sws Nullmutationen zu erzeugen. Die Zielsetzungen des geplanten Forschungsprojekts bestehen zum einen darin, die Entwicklung und Differenzierung des zentralen und peripheren Nervensystems in diesen Mäusen zu untersuchen. Daneben soll in Kooperation mit der Gruppe von Paul Glynn in Leicester (UK) die Sensivität dieser Mäuse gegenüber OPs untersucht werden. Da bislang präliminäre Experimente eine Funktion des NTE/sws-Proteins als Membrankanal nahelegen, sollen aus embryonalen Stammzellen neuronal differenzierte Zellkulturen erzeugt und mittels patch-clamp Untersuchungen hinsichtlich ihrer membrangebundenen Kanalaktivität im Vergleich zu Wildtyp-Zellen untersucht werden. Und schließlich ist geplant, in einem experimentellen Nervenläsionsmodell, die Regenerationsfähigkeit peripherer Nerven in NTE/sws-defekten und unveränderten Mäusen zu messen, und in Kooperation mit Gerhard Giegerich innerhalb der Forschergruppe den Einfluß der NTE/sws Mutation auf Demyelinisierung und Remyelinisierung anhand eines Modells der Experimentellen Autoimmunenzephalitis (EAE) zu untersuchen.