ヒトインヒビン及びアクチビンの遺伝子工学的産生

人类抑制素和激活素的基因工程生产

• 批准号: 63570769
• 负责人: 宮本 薫
• 金额: $ 1.34万
• 依托单位: Gunma University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
• 财政年份: 1988
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1988 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-63570769/
• 关键词: ヒトインヒビン; CHO細胞; 発現ベクター

1.ヒト卵巣のcDNAライブラリーから、ヒトインヒビンの鎖、β_B鎖のcDNAのクローニングを行った。α鎖は1.3Kb、β_B鎖は2.2Kbであり、いずれも、すべてのコーディング領域を含んでいる事を、塩基配列を決定する事により確認した。2.この様にして単離したヒトインヒビンα鎖、β_B鎖のcDNAを発現ベクターpSD(X)に組みこみ、CHO(dhfr-)細胞にトランスフェクトして、メトトレキセート耐性を利用して、ヒトインヒビン産生細胞株を樹立した。ヒトインヒビンは、分子量32KDa、αβ_B型である事をインヒビン産生CHO細胞株の培養上澄をチェックして確認した。また、この様にして生産された、recombinantヒトインヒビンのBioactivityは、下垂体前葉細胞系で検討したところ、ED_<50>=0.8ng/mlであり、天然のウシインヒビン、ブタインヒビンよりむしろ比活性はやや高く、完全なBioactivityをもつインヒビン分子が生産されている事を確認した。

1. The cDNA sequence of the cDNA sequence. Alpha lock is 1.3Kb, beta lock is 2.2Kb, beta lock is 2Kb, beta lock is 2.2Kb, beta lock is 2Kb, beta lock 2. The cDNA of α-and β-lock was detected in pSD(X) and CHO(dhfr-) cells, and cell lines were established by using the cDNA of α-and β-lock. CHO cell lines were produced by the production of CHO cells with molecular weight of 32KDa and αβ_B type. In addition, this study confirmed that the activity of recombinant protein was higher than that of natural protein, ED_<50>=0.8ng/ml, and the activity of recombinant protein was higher than that of natural protein.

项目成果

H.Sugino,;T.Nakamura,;Y.Hasegawa,et al.: Biochem,Biophys.Res.Commun.153. 281-288 (1988)

H.Sugino,;T.Nakamura,;Y.Hasekawa,et al.:Biochem,Biophys.Res.Commun.153。

H.Sugino,;T.Nakamura,;Y.Hasegawa,et al.: J.Biol.Chem.268. 15249-15252 (1988)

H.Sugino,;T.Nakamura,;Y.Hasekawa,et al.: J.Biol.Chem.268。

Y.Hasegawa,;K.Miyamoto.;Y.Abe,et al.: Biochem,Biophys.Res.Commun.156. 668-674 (1988)

Y.Hasekawa,;K.Miyamoto.;Y.Abe,et al.:Biochem,Biophys.Res.Commun.156。

T.Sakai,;K.Inoue,;Y.Hasegawa,;K.Kurosumi.: Endocrinology. 122. 2803-2808 (1988)

T.Sakai,;K.Inoue,;Y.Hasekawa,;K.Kurosumi.：内分泌学。

Y.Hasegawa,;K.Miyamoto.;S.Iwamura,;M.Igarashi.: J.of Endocrinol.118. 211-219 (1988)

Y.Hasekawa，；K.Miyamoto.；S.Iwamura，；M.Igarashi.：J.of Endocrinol.118。