ヒトインヒビン及びアクチビンの遺伝子工学的産生

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1.ヒト卵巣のcDNAライブラリーから、ヒトインヒビンの鎖、β_B鎖のcDNAのクローニングを行った。α鎖は1.3Kb、β_B鎖は2.2Kbであり、いずれも、すべてのコーディング領域を含んでいる事を、塩基配列を決定する事により確認した。2.この様にして単離したヒトインヒビンα鎖、β_B鎖のcDNAを発現ベクターpSD(X)に組みこみ、CHO(dhfr-)細胞にトランスフェクトして、メトトレキセート耐性を利用して、ヒトインヒビン産生細胞株を樹立した。ヒトインヒビンは、分子量32KDa、αβ_B型である事をインヒビン産生CHO細胞株の培養上澄をチェックして確認した。また、この様にして生産された、recombinantヒトインヒビンのBioactivityは、下垂体前葉細胞系で検討したところ、ED_<50>=0.8ng/mlであり、天然のウシインヒビン、ブタインヒビンよりむしろ比活性はやや高く、完全なBioactivityをもつインヒビン分子が生産されている事を確認した。