Charakterisierung der Faltungs- und Fehlfaltungseigenschaften des Hamster-Prionproteins

用FT-IR差示光谱和微流控技术检测离液培养物中与瘙痒症相关的朊蛋白PrP 27 -30的聚集和聚集。洗涤剂/脂质/蛋白质混合物和H/D-Austausch试验显示朊蛋白的结构特征韦尔登。通过对K蛋白酶的研究，发现其对离液产物的结构和聚集体有明显的影响。由于PrP 27 -30是263 K的Stammes，因此可以从隔离仓鼠的区域进行测试，也可以使用PrP和Hamster-adaptierter Prionstämme，进行韦尔登的结构测试。本文韦尔登将傅里叶变换红外光谱法系统地研究β-PrPc（90-231）在b-Faltblatt-reiche Variante b-RpP durchgeführt中的转化。因此，必须将PrPc（90-231）的荧光光谱测定结果与pH值和浓度的关系进行比较，以确定其还原形式。为了进一步研究韦尔登，对b-PrP进行了体外实验，以研究天然PrPc的体外成纤维作用。

Anhand von vergleichenden in vitro Untersuchungen zur Faltung und Aggregation des Scrapie-assoziierten Prionproteins PrP27-30 sollen mittels FT-IR Differenzspektroskopie und Mikro-StoppedFlow Techniken Ent- und Rückfaltungsversuche in chaotropen Agenzien bzw. Detergens/Lipid/Protein-Mischungen und mittels H/D-Austauschexperimenten die Struktur des Prionproteins charakterisiert werden. Mit Hilfe von Proteinase K Verdau-Experimenten und FT-IR Spektroskopie wird geprüft, inwieweit die Struktur der Rückfaltungs- und Aggregationsprodukte aus chaotropischen Agenzien mit denjenigen der Ausgangsprodukte übereinstimmen, und ob sie Infektiösität besitzen. Es soll sowohl das PrP27-30 des Stammes 263K, welches aus verschiedenen Arealen des Hamsterhirns isoliert wird, als auch das PrPres anderer Hamster-adaptierter Prionstämme, hinsichtlich struktureller Unterschiede untersucht werden. Weiter werden mittels zeitaufgelöster FT-IR Spektroskopie systematische Faltungsstudien zur Konversion des Hamster PrPc(90-231) in die b-Faltblatt-reiche Variante b-RpP durchgeführt. Hierfür müssen die Faltungseigenschaften sowohl des intakten PrPc(90-231) als auch seiner reduzierten Form in Abhängigkeit des pH-Werts und der Konzentration chaotropischer Agenzien charakterisiert werden. In weitergehenden Untersuchungen werden, ausgehend vom b-PrP, Langzeitexperimente zur in vitro Fibrillogenese aus nativem PrPc durchgeführt.