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好中球及びマクロファ-ジに於ける活性酸素生成機構の解析

中性粒细胞和巨噬细胞产生活性氧的机制分析

基本信息

批准号：
01570556
负责人：
綱脇祥子
金额：
$ 1.34万
依托单位：
National Research Institute for Child Health and Development
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
财政年份：
1990
资助国家：
日本
起止时间：
1990 至 1991
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-01570556/
关键词：
活性酸素 NADPH oxidase affinity label 慢性肉芽腫症 GTP@GDP NADPH NADPH analogue

项目摘要

1、NADPH結合タンパク質の同定現在、p15.0の位置にO_2^ー生成活性を見いだしているが、完全には精製されていない。そこで、基質であるNADPHのアナログ([ ^<32>P]2',3'ーdialdehyde NADPH)を[rー ^<32>P]ーATPとNAD^+を用いて合成した。Schiff's base形成後、SDSーPAGE、Autoradiographyを行い、分子量の同定を行い80Kであることを確認した。2、近年、活性酸素生成に関与している構成成分の分子構造が決定された。そこで、それらの分子に対するpolypeptideを合成して、これら分子に対する特異抗体を調製した。3、上記の抗体を用いて、遺伝的に生成能を欠く慢性肉芽腫症の分類に用い、各種欠損型を見いだした。4、活性酸素生成機構に於て電子の入口、即ちNADPH結合タンパク質は、まだ同定されていない。細胞質側に存在するp47ーphox、p67ーphoxのどちらかがNADPH結合タンパク質であり、細胞刺激後、細胞質から細胞膜へ移行して活性酸素が生成されると考えられている。しかし、活性化された細胞膜には、67Kおよび47kのいちにバンドは認められず、80Kのみが確認された。

1. NADPH binding activity of p15.0 was completely purified. NAD <32><32>^+ is a compound of ATP and NADPH. After the formation of Schiff's base, SDS PAGE and Autoradiography were performed, and the molecular weight was determined. 2. In recent years, the molecular structure of active acid components is determined by the relationship between active acid production and active acid composition. This is the first time that a molecule has been synthesized and a specific antibody has been modulated. 3. The above mentioned antibody can be used to classify chronic granuloma, and various types of deficiency can be seen. 4. The mechanism of active acid production is related to the entrance of electron, namely NADPH, and the quality of the compound is determined. p47-phox and p67-phox are present in the cytoplasm, and NADPH is bound to the cytoplasm. After cell stimulation, the cytoplasmic membrane shifts and active acids are produced. The cell membrane was activated at 67K and 47K. The cell membrane was activated at 80K.