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単クロ-ン抗体による神経系超微量ガングリオシドの構造と機能の解析

使用单克隆抗体分析神经系统中超痕量神经节苷脂的结构和功能

基本信息

批准号：
01580170
负责人：
平林義雄
金额：
$ 0.9万
依托单位：
University of Shizuoka
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
财政年份：
1989
资助国家：
日本
起止时间：
1989 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-01580170/
关键词：
ガングリオシド単クロ-ン抗体神経細胞分化抗原シアル酸

项目摘要

ニワトリの初期発生段階の神経細胞と特徴的に反応する単クロ-ン抗体のなかからC-シリ-ズガングリオシド特異的に反応する抗体M6704を使い、ラット胎児脳の発達に伴うC-シリ-ズガングリオシドの分析を行った。その結果、ラット胎児脳にはM6704抗体と反応するガングリオシドはほとんど検出されなかった。しかし、ガングリオシドをあらかじめアルカリ水解しておくと、GT_3と同一Rf値を示す抗原物質が出現した。この新しいアルカリ不安定なガングリオシドはタイプC型のインフルエンザに含まれるO-アセチルエステラ-ゼによって容易に分解され、GT_3を生じる事実より、GT_3のシアル酸部分の9位がアセチル化されていることが示唆された。数多くの単クロ-ン抗体のなかから、アルカリ不安定なガングリオシドと反応する抗体が存在するか否かスクリ-ニングしてみたところ、493D4抗体がアルカリ不安定なC-シリ-ズガングリオシドと特異的に反応することを見出した。493D4抗体を使うことにより、抗原物質が魚類であるカツオの脳に比較的多く存在していることを見出したので、現在、カツオ脳2kgより精製を試みている。一方、牛脳ガングリオシドの超微量成分、GMlb、GDlαの精製、構造決定に成功し、更に、GMlbに対する特異的単クロ-ン抗体の作製にも成功した。GMlb特異抗体を利用することにより、GMlbはニワトリ、ラットの生前の脳に出現してくることが判明した。GMlb→GDlαの生合成経路は、カエルの脳(成体)で知られていたが、ホ乳類、鳥類では胎児期に出現してくることが初めて見出された。以上、神経系の発生、発達のあるステ-ジで、新しいタイプのガングリオシドが特徴的に出現してくることを見出した。

ニワトリのInitial Stage of Birth Cell Special Antibody Antibody のなかからC-シリ-ズガングリオシド特Idiosynthetic anti-antibody M6704 is used for analysis of を行った of ラット煐児脳の発达に恆C-シリ-ズガングリオシドの.そのRESULTS, ラット fetal 児脳にはM6704 antibody とanti-応するガングリオシドはほとんど検出されなかった.しかし, ガングリオシドをあらかじめアルカリhydrolysis しておくと, GT_3とThe same Rf〤をshows すantigenic substance がappears した.この新しいアルカリ无码なガングリオシドはタイプC typeのインフルエンザに恾れるO-アセチルエステラ-ゼによってIt is easy to decompose され, GT_3 を生じる事実より, GT_3 のシアル acid part の9-bit がアセチル化されていることが时攆された. A lot of くの単クロ-ンantibodies のなかから、アルカリ unstable なガンAnti-antibody antibodies exist and no antibodies existしてみたところ, 493D4 antibody がアルカリ unstable なC-シリ-ズガングリオシドとSpecial に濜することを见出した. 493D4 Antibody をうことにより、Antigenic substance がfish であるカツオの脳にComparatively many くExistence of していることを见出したので, now, カツオ脳 2kg より refined をtrial みている. One side, ultra-trace ingredients of beef jerky, GMlb, GDlα, refined, structurally determined, and more specific じクロ-ン antibodies specific to GMlb are successfully produced. GMlb-specific antibodies have been identified using the use of GMlb はニワトリ and ラットの生の脳に. GMlb→GDlαの生成経路は、カエルの脳(成体)で知られていたが, ホbreasts, birds では fetal stage に appears してくることがInitial めて见出された. Above, the gods of the gods, the gods of the gods, the new onesのガングリオシドが特徴的にappearsしてくることを见出した.