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スフィンゴ糖脂質による細胞膜極性の形成機構と生物機能の発現

细胞膜极性的形成机制及鞘糖脂生物功能的表达

基本信息

批准号：
08672549
负责人：
平林義雄
金额：
$ 1.28万
依托单位：
The Institute of Physical and Chemical Research
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
财政年份：
1996
资助国家：
日本
起止时间：
1996 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-08672549/
关键词：
ガングリオシドスフィンゴ脂質グルコシルセラミド

项目摘要

糖脂質完全欠損細胞株、GM-95、および欠損酵素グルコシルセラミドの合成酵素遺伝子を導入し再び糖脂質を発現する細胞株を用意することによりスフィンゴ脂質の糖鎖部分の機能解析を試みた。細胞のの形態、増殖性等には、大きな変化を見いだすことができなかった。この結果は、"糖脂質は細胞の生存には関与していない"との考えに一致していた、。しかし、細胞が増殖しコンフルエントに達した時の細胞密度に違いが観察された、細胞間の接着にスフィンゴ脂質糖鎖が関与している可能性が考えられた。中枢神経系には、微量成分を含めると100種以上の構造を異にするシアル酸含有糖脂質ガングリオシドが存在する。申請者は、微量成分ガングリオシドの中からアルカリ不安な成分が存在していることを見いだし、それらの化学構造を決定したところ、b系列に属する一連のガングリオシドの末端シアル酸の9位の水酸基がアセチル化されていた。このO-アセチル化シアル酸を認識する単クローン抗体、D1.l、493D4を使い、発現クローニングによりアセチル基の生合成の関わる因子をコードしているcDNAをクローニングすることに成功した。遺伝子構造を解析したところ、この遺伝子は全く新しいタンパクをコードしていることが判明した。このタンパクは極めて疎水性に富んでおり、複数の(6カ所)の膜貫通領域を有していた。免疫組織学的検索から、小胞体に局在していることが示された。あらゆる組織に広く分布し、且つ進化的にも良く保存されていることから、この遺伝子は機能的に重要なタンパクをコードしていることが予想された。

The function analysis of glycolipid part of glucose deficient cell line, GM-95 and glucose deficient cell line was studied. Cell morphology, reproduction, etc., large and small, see the middle and small. The results showed that the survival of glycolipid cells was related to the survival of glycolipid cells. The possibility of cell density variation during cell proliferation and intercellular lipid sequestration was examined. The central nervous system contains more than 100 kinds of structural differences, including sugar and lipid. The applicant has determined the chemical structure of the trace component, the amino acid group at the 9-position of the terminal acid, and the amino acid group at the 9-position of the terminal acid. The use of this monoclonal antibody, D1.1, and 493D4 to recognize O-glucuronic acid has successfully enabled the cloning of cDNA for factors related to the biosynthesis of glucuronic acids. The structure of the gene is analyzed and the gene is completely new. The membrane penetration area of the complex (6) is rich in water. Immunohistochemical examination of small cells was performed. The organization is distributed, and the evolution of the organization is well preserved.