Interaktionen der Raf-Protein-Kinasen mit den kleinen und heterotrimeren G-Proteinen. Aktivierung der cRaf-MAP-Kinase-Kaskade durch die G-Protein-gekoppelte Rezeptoren

Raf 蛋白激酶与小 G 蛋白和异三聚体 G 蛋白的相互作用。

• 批准号: 5236716
• 负责人: Professor Dr. Ulf Rüdiger Rapp
• 金额: --
• 依托单位: Institut für Medizinische Strahlenkunde und Zellforschung der Universität Würzburg (aufgelöst)
• 依托单位国家: 德国
• 项目类别: Priority Programmes
• 财政年份: 1995
• 资助国家: 德国
• 起止时间: 1994-12-31 至 2001-12-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://gepris.dfg.de/gepris/projekt/5236716?language=en
• 关键词: Interaktionen; der; Raf; Protein; Kinasen

Die Aktivierung der Raf-Kinasen durch Rezeptor-Tyrosin-Kinasen ist streng mit ihrer Phosphorylierung und Bildung von Multiprotein-Komplexen verbunden. Neuere Untersuchungen weisen darauf hin, daß auch die G-Protein-gekoppelten Rezeptoren (GPCRs) in der Lage sind, die Raf-MAP-Kinasen zu aktivieren. In diesem Prozeß scheinen mehrere Komponenten wie z.B. Src- und PI3-Kinasen, Gbg-Untereinheiten und b-Arrestin beteiligt zu sein. Das Hauptziel dieses Antrags besteht in der Aufklärung des Reaktionsmechanismus, der durch GPCR-induzierte Stimulation der cRaf-MAPK-Kaskade zustande kommt. Im einzelnen sollen folgende drei Schwerpunkte verfolgt werden: (i) Untersuchung der cRafInteraktionen mit diversen Gbgs und PI3-Kinasen. Die quantitative Auswertung dieser Interaktionen wird durch Rekonstitution der gereinigten Komponenten in die Lipidvesikel erfolgen. (ii) Aufklärung der einzelnen Schritte in der GPCR-induzierten Aktivierung der cRaf-MAPK-Kaskade unter besonderer Berücksichtigung der Beteiligung von Src- und PI3-Kinasen, sowie b-Arrestins und schließlich werden wir (iii) mit Hilfe der PSD-Maldi-MS die Phosporylierungszustände der cRaf-Kinase in Abhängigkeit des Aktivierungsmodus bestimmen. Es ist auch vorgesehen, durch Anwendung dieser hochempfindlichen Meßtechnik die Zusammensetzung der cRaf-Aktivierungskomplexe aufzuklären.

通过受体酪氨酸激酶对Raf-Kinasen的激活作用通过其磷酸化和对多蛋白复合物的培养而增强。新的研究表明，拉格中的G蛋白偶联反应（GPCR）也是一种有效的反应。在这个过程中，我们看到了z.B. Src-和PI 3-激酶，Gbg-未结合和b-抑制蛋白结合。通过cRaf-MAPK-Kaskade的GPCR诱导刺激，Antrags在反应机制的建立中发挥了重要作用。在一个解决方案中有三个Schwerpunkte verfolgt韦尔登：（i）使用不同的Gbgs和PI 3-Kinasen对cRafInteraktionen进行研究。通过重新定义脂质体的组成部分，可以定量地确定相互作用。(ii)通过对Src-和PI 3-Kinasen结合的研究，在GPCR-诱导cRaf-MAPK-Kaskade活化过程中增加一种抑制剂，因此，b-抑制和抑制韦尔登将（iii）通过PSD-Maldi-MS的帮助，使cRaf-Kinase的磷酸化作用在活化过程中发挥作用。这也是一个很好的发现，通过使用高性能的机械技术来提高cRaf-Aktivierungskomplexe的效率。