Interaktionen der Raf-Protein-Kinasen mit den kleinen und heterotrimeren G-Proteinen. Aktivierung der cRaf-MAP-Kinase-Kaskade durch die G-Protein-gekoppelte Rezeptoren

Raf-Kinasen的Aktivierung der Raf-Kinasen rezeptor-Tyrosin-Kinasen ist Streng MIT Ihrer Phylorylierung and Bildung von Multitein-Komplexen verbunden.Neuere Untersuhugen Weisen darauf hin，da？auch die G-Protein-gekoppelten Rezeptoren(GPCRs)in der Lage Sind，die Raf-MAP-Kinasen zu aktivieren.SRC-和PI3-Kinasen，GBG-Untereinheiten和b-arrestin beeigt t zu sein。Das Hauptziel is Antrags besteht in der Aufklärung des Reaktionsmmachismus，der das Hauptzieles besteht in der Aufklärung des Reaktionsmmachismus，der Das Hauptzieles Antrags besteht in der Aufklärung des Reaktionsmmachismus，der das Hauptzierte be desteht in der Aufklärung des ReaktionsmMachismus，der das Hauptzieles Antrags besteht in der Aufklärung des Reaktionsmmachismus，der der GPCRINZIERTE EXECTIVE DER CRAF-MAPK-KASK我是Sollen Folgende Drei Schwerpenkte verfolgt：(I)不同的人有不同的GBG和PI3-Kinasen。在此基础上，提出了一种新的定量检测方法。(Ii)在CRAF-MAPK-Kaskade下的Aufklärung der einzelnen Schritte，Berück sichtigung der Beteiligung von Src-und PI3-Kinasen，Sowie b-arrestins and Schlieülich wir wir(Iii)MIT Hilfe der PSD-MALDI-MS die Phosporylierungszuständer CRAF-Kinase in ABHängikeit des Aktivierungszuständer CRAF-Kinase。这是一件很重要的事情，我不知道该怎么做，因为这是一种新技术。

Die Aktivierung der Raf-Kinasen durch Rezeptor-Tyrosin-Kinasen ist streng mit ihrer Phosphorylierung und Bildung von Multiprotein-Komplexen verbunden. Neuere Untersuchungen weisen darauf hin, daß auch die G-Protein-gekoppelten Rezeptoren (GPCRs) in der Lage sind, die Raf-MAP-Kinasen zu aktivieren. In diesem Prozeß scheinen mehrere Komponenten wie z.B. Src- und PI3-Kinasen, Gbg-Untereinheiten und b-Arrestin beteiligt zu sein. Das Hauptziel dieses Antrags besteht in der Aufklärung des Reaktionsmechanismus, der durch GPCR-induzierte Stimulation der cRaf-MAPK-Kaskade zustande kommt. Im einzelnen sollen folgende drei Schwerpunkte verfolgt werden: (i) Untersuchung der cRafInteraktionen mit diversen Gbgs und PI3-Kinasen. Die quantitative Auswertung dieser Interaktionen wird durch Rekonstitution der gereinigten Komponenten in die Lipidvesikel erfolgen. (ii) Aufklärung der einzelnen Schritte in der GPCR-induzierten Aktivierung der cRaf-MAPK-Kaskade unter besonderer Berücksichtigung der Beteiligung von Src- und PI3-Kinasen, sowie b-Arrestins und schließlich werden wir (iii) mit Hilfe der PSD-Maldi-MS die Phosporylierungszustände der cRaf-Kinase in Abhängigkeit des Aktivierungsmodus bestimmen. Es ist auch vorgesehen, durch Anwendung dieser hochempfindlichen Meßtechnik die Zusammensetzung der cRaf-Aktivierungskomplexe aufzuklären.