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糖鎖を利用したがん関連抗原の新しい超高感度測定法の開発とそのがん早期診断への応用

利用糖链开发新型超灵敏检测癌症相关抗原的方法及其在早期癌症诊断中的应用

基本信息

批准号：
02152092
负责人：
石川栄治
金额：
$ 1.02万
依托单位：
宮崎医科大学
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Cancer Research
财政年份：
1990
资助国家：
日本
起止时间：
1990 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

肝炎、肝硬変を伴わず、αーフェトプロテイン(AFP)の血清中の濃度が正常値の上限か、それを少し越える程度である場合の肝がんの早期診断を可能にするため、がん性糖鎖AFPを測定するシステムを開発した。血清中のAFPとジニトロフェニル(DNP)化抗AFP抗体を反応させ、形成された複合体を抗DNP抗体不溶化固相の上にトラップし、固相を洗浄した後、複合体を固相から溶出し、Lens culinaris agglutinin(レクチン)不溶化固相とβーDーガラクトシダ-ゼ標識抗AFP Fab'を用いて測定した。その結果、レクチンとの結合の強さに応じて、3.5ー100ng/mlの感度で測定できることがわかった。これは、DNP化抗AFP抗体を使わないで、レクチン不溶化固相と酵素標識抗AFP Fab'あるいは抗AFP抗体不溶化固相と酵素標識レクチンを用いて測定する場合に比べて約30倍の高感度化であった。さらに、レクチン・カラムにより分画した後にAFPとしてサンドイッチ法で測定すると、がん性糖鎖AFPの30pg/mlまで測定できることがわかり、健常者では、このレベル以下であった。肝炎、肝硬変症を伴わない、直径1.8ー5.5cmの肝細胞がんのケ-スで、血清中AFP38ー81ng/mlのうち1ー55ng/mlのがん性糖鎖AFPが検出された。直径1.8cmの肝細胞がん、AFP38ng/mlのケ-スで、がん性糖鎖AFP1ng/ml(検出限界あるいは健常者レベルの少くとも30倍)が検出されたことはAFPを産出するがんのより早期の診断に役立つことを示唆している。また、AFPに限らず、健常者血清中には可及的低濃度で存在する、がん性糖鎖たんぱくの高感度測定が、がんの早期診断に役立つことが予想される。しかし、いくつかの問題点がある。がん性糖鎖AFPは、肝炎、肝硬変でも検出されるだけでなく、肝がんでも検出されないことがあるので、それだけ有用性が限定される。また、レクチンの親和性は概して弱いので、この点の克服が課題である。

Hepatitis, liver cirrhosis associated with the detection of α-glucosamine (AFP) serum concentration from the upper limit of normal values, or more than a few degrees, the early diagnosis of liver disease may be possible, and the detection of α-glucosamine AFP is open. Anti-AFP antibody in serum was detected by ELISA, complex formation, solid phase dissolution of anti-DNP antibody, Lens culinaris agglutinin(DNP) insoluble solid phase dissolution, and anti-AFP Fab identification. Results: 3.5 - 100ng/ml sensitivity determination The sensitivity of anti-AFP antibody to DNP is about 30 times higher than that of anti-AFP antibody to DNP. The AFP was determined by the method of "separation" and the AFP was determined by the method of "separation". The AFP was determined by the method of "separation" and the AFP was determined by the method of "separation". The AFP was determined by the method of "separation" and the AFP was determined by the method of "separation". Hepatitis, cirrhosis, liver cells 1.8 - 5.5cm in diameter, AFP38 - 81ng/ml in serum, AFP 55ng/ml in serum Liver cells with a diameter of 1.8 cm, AFP38ng/ml, AFP1ng/ml(detection limit: 30 times less than normal), AFP detection: 30 times less than normal, AFP detection: 30 times less than normal, AFP detection: 30 times less than normal. The presence of AFP in serum of healthy individuals at low concentrations, the detection of high sensitivity of AFP, and the early diagnosis of AFP should be considered.しかし、いくつかの问题点がある。AFP, hepatitis, cirrhosis, liver cirrhosis, liver The affinity of the two groups is weak, and the problem of overcoming them is difficult.