高分子多価抗原の超高感度酵素免疫測定法に関する基礎的研究

超灵敏酶联免疫吸附测定高分子多价抗原的基础研究

• 批准号: 61570130
• 负责人: 石川 栄治
• 金额: $ 1.15万
• 依托单位: 宮崎医科大学
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
• 财政年份: 1986
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1986 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-61570130/
• 关键词: 酵素免疫測定法; エンザイムイムノアッセイ; 高分子抗原

高分子多価抗原の超高感度酵素免疫測定法を開発するために、標識酵素の超高感度活性測定法と酵素免疫測定システムの超高感度化に関する基礎的研究を行った。標識酵素の超高感度活性測定法を開発するために蛍光法と発光法とを試みた。4-メチルウムベリフェリル・β-D-ガラクトピラノシドを基質として大腸菌β-D-ガラクトシダーゼの活性を蛍光法で測定した結果、0.0003amol(180分子)まで測定することができた。O-ニトロフェニル・β-D-ガラクトピラノシドあるいは4-メチルウムベリフェリル・β-D-ガラクトピラノシドを基質として大腸菌β-D-ガラクトシダーゼの活性をNADHの生物発光法により測定した結果、0.0001amol(60分子)まで測定することができた。(生物発光法では、β-D-ガラクトシダーゼ活性により上記基質からガラクトースを生成させ、ついでガラクトース脱水素酵素によりNADHを形成させて測定した。)今後、測定条件をさらに詳細に検討することにより一層の超高感度化が可能と考えられた。酵素免疫測定システムの超高感度化をはかるために種々の試みを行った。我々は、すでにウサギなどのポリクローンIgGをペプシンで消化した後、還元してFab'にすることにより、酵素標識抗体の固相への非特異吸着が少くなり高感度化に有利であることを実証しているが、最近、多用されているマウス・モノクローン抗体の経験を増すことにより、そのことがより一般的であることを確認した。また、固相の材質と酵素標識抗体の性状が、どのように酵素標識抗体の固相への非特異吸着に影響するかを検討した結果、一般的な結論は得られなかったものの、今後固相の材質、酵素標識抗体の性状をより一層詳細に検討することにより、非特異吸着を低下させ、より一層の高感度化を行うことができる見通しを得た。

The study of enzyme immunoassay for the determination of high molecular weight polypeptide antigen ultra-high sensitivity enzyme immunoassay and enzyme immunoassay for the determination of the activity of high-sensitivity enzyme immunoassay and enzyme immunoassay for the determination of ultra-high sensitivity enzyme immunoassay. The determination of the activity of enzyme with ultra-high sensitivity was carried out by photoluminescence method. The results were determined by photoluminescence assay, 0.0003amol (molecular weight 180) and β-D (molecular weight) respectively. The results of NADH bioluminescence assay were determined by bioluminescence assay, and the results were determined by 0.0001amol (60 molecule) assay. (biological photoluminescence assay, β-D-phenotypic acid assay, bioluminescence assay, biochemistry, bioassay.) In the future, it is possible to test the conditions of ultra-high sensitivity. Enzyme immunoassay was used to determine the ultra-high sensitivity of all kinds of drugs. We do not know how to treat IgG after digestion, Fab', enzyme identification, solid-phase absorption, low-dose, high-sensitivity, low-dose, low-dose Please confirm that you do not need to know what to do. The results of the general results show that the characteristics of the enzyme labelled antibodies of the solid phase and the enzyme labeled antibodies of the solid phase and enzyme labelled antibodies of the solid phase and the enzyme labelled antibodies of the solid phase, the solid phase, the enzyme labelled antibodies, the solid phase, the solid phase, the enzyme labeled antibodies, the solid phase, the solid phase, the enzyme labelled antibodies, the solid phase, the solid phase, the enzyme labelled antibodies, the solid phase, the enzyme labelled antibodies, the solid phase, the solid phase, the enzyme labelled antibodies, the solid phase, the solid phase, the enzyme labelled antibodies, the solid phase, the solid phase, the enzyme-labeled antibodies, the solid phase, the solid phase, the enzyme-labeled antibodies, the solid-phase antibodies, the enzyme-labeled antibodies, the solid-phase antibodies, the enzyme-labeled antibodies, the solid-phase antibodies, the enzyme-labeled antibodies, the solid-phase antibodies, the enzyme-labeled antibodies, the solid-phase antibodies, the enzyme-labeled antibodies, the solid-phase antibodies, the enzyme-labeled I don't know how to get a high degree of sensitivity in the first place.

项目成果

Toru Mori,et al.: Clin.Endocrinol.(1987)

森彻 (Toru Mori) 等：临床内分泌学 (1987)

Ke-He Ruan,et al.: Anal.Lett.(1987)

阮克和等：《分析快报》(1987)