ヒトスカベンジャ-受溶体遺伝子の構造解析とDNA多形性を用いた動脈硬化症の解析

利用 DNA 多态性进行人类清道夫受体基因的结构分析和动脉硬化分析

• 批准号: 02670130
• 负责人: 江見 充
• 金额: --
• 依托单位: National Cardiovascular Center Research Institute
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
• 财政年份: 1990
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1990 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-02670130/
• 关键词: スカベンジャ-受容体; 遺伝子; DNA多形性; 連鎖解析; 第8染色体; 動脈硬化症

ヒトスカベンジャ-受容体遺伝子を単離する目的で、ヒトコスミドライブラリ-をスクリニ-ングし、6個のゲノミック・クロ-ンを得た。また、ラムダファ-ジライブラリ-からは2個のゲノミック・クロ-ンを得た。各クロ-ンの制限酵素地図を作製し連結したところ、約120Kbのゲノム領域がクロ-ン化され、スカベンジャ-受容体遺伝子の大きさは80Kb以上に達することが判明した。スカベンジャ-受容体には、I型、II型の2種類のmRNAが存在するが、この両者は単一の遺伝子から3'側のエキソンのalternative splicingにより生ずることがわかった。本遺伝子は11個のエキソンからなり、エキソンの構成とタンパクの機能ドメインの間に対応が認められた。すなわち、第1エキソンは5'非翻訳領域、第2エキソンは細胞質内ドメインの前半、第3エキソンは細胞質内ドメインの後半と細胞膜通過ドメイン、第4と第5エキソンはN結合糖鎖ドメイン、第6、第7、第8エキソンはコラ-ゲン様ドメインを各々コ-ドしていた。以上第8エキソンまでがI型、II型に共通のエキソンであった。さらにII型特異的ドメインとII型3'非翻訳領域が第9エキソンとして続き、次にI型特異的ドメインをコ-ドする第10エキソンとI型3'非翻訳領域をコ-ドする第11エキソンが続いた。各エキソンとその周囲のイントロンの塩基配列を決定したので、PCR法を用いて末梢血DNAから直接に本遺伝子の構造異常を迅速に検出することが可能となった。本遺伝子をプロ-ブとしてサザン・ブロッド法によるDNA多形性解析を行い、pMEsr1、pMEsr2、pMEsr3の3つの多形性DNA(RFLP)マ-カ-を単離した。これらマ-カ-とCEPH標準家系DNAを用いた連鎖解析により本遺伝子のヒト遺伝地図上の位置を第8染色体短腕上に決定した。また、これらの遺伝的マ-カ-を用いた動脈硬化症の遺伝学的関連性解析を行うことが可能となった。

The child of the recipient is free from the destination, the recipient, the recipient and the recipient. No, no. Each enzyme is used to limit the activity of the enzyme, which is related to the field, 120Kb, and the capacitive system. The temperature is higher than that of the 80Kb. Type I, type II, type 2 mRNA have some symptoms, and the recipient may have a warning that the alternative splicing will not survive. The 11 sub-units of our hospital are eligible for the establishment of health care units, which can be divided into two groups. The first half of the cell, the third half of the cell, the second half of the cell membrane, the fourth, the fifth, the third, the second half of the cell, the second half of the cell. Type I and II are common to all of the above types 8. Type II