CD4.陽性ヒト表皮ランゲルハンス細胞の研究

CD4阳性人表皮朗格汉斯细胞的研究

• 批准号: 02670473
• 负责人: 玉置 邦彦
• 金额: $ 1.34万
• 依托单位: 山梨医科大学
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
• 财政年份: 1990
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1990 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-02670473/
• 关键词: ランゲルハンス細胞; クラスIIMHC; ICAMー1; ケラチノサイト

表皮ランゲルハンス細胞(LC)が,種々の条件下で通常ほとんど発現していないCD4分子を強く発現するようになることが知られているがその機序については明らかでない。今回我々はその点を明らかにする目的で,手術時に得られたヒト皮膚を用いて,皮下組織を除去したあと,無血清培地であるKeratinocyte Conditioned Medicim(KGM)中で培養し,その培養液中にヒトのリコンビナントILー1,ILー2,ILー4,IFNーYなどを加えることによって検討した。培養開始後24,48,72時間毎とり出して(1)OCTコンパウンドに包理し凍結し,6μ切片を作成し,(2)一部は,トリプシン,DNase処理で細胞浮遊液とし,シェルドンサィトスピンを用いてスライドグラス上にのせ,(3)また残りは,チオシアン酵ナトリウムにより表皮シ-トを作成後.アセトン固定し,これらについて.免疫組織学的に検討した。免疫組織学的検討は,Len3a,HLAーDR,ーDP,ーDQ,ICAMー1,Len2aなどのモノクロ-ナル抗体を用いて蛍光抗体法で行なった。今回の実験に用いたサイトカインによってヒトLCにCD4分子の発現増強を観察することはできなかった。現在,これらのサイトカインを組み合わせることによってCD4分子の発現増強がみられるか否かについて検討中である。今回の検討中に,IFNーγによって表皮ケラケノサイト(KC)がHLAーDR,ICAMー1を発現することが確認される共に,その発現がビタミンD3によって影響をうけることが明らかとなったため,そのことを更に詳細に検討した。一方,in viroにおけるLCに対する各換サイトカインの影響を検討していたところ,TNFーαによって,KCのクラスIIMHCの発現増強がみとめられたため,それについて詳細に検討を加えた。

Epidermal cells (LC) are usually expressed under conditions where CD4 molecules are strongly expressed. In order to achieve this goal, we need to remove the subcutaneous tissue from the skin during surgery and culture it in serum-free Keratinocyte Conditioned Medicim(KGM). We need to add IL-1,IL-2,IL-4,IFN-Y to the culture medium. 24, 48, 72 hours after the start of culture: (1)OCT is processed and frozen, 6 μ sections are prepared,(2) a part of cell suspension is treated with DNase, and (3) a part of cell suspension is prepared. It's fixed, and it's fixed. Immunohistologic examination. Immunohistochemical studies were carried out on Len3a,HLA DR, DP, DQ,ICAM 1,Len2a and anti-HLA antibodies. Now we're going to use it to detect the presence of CD4 molecules. Now, the CD4 molecule is growing stronger and stronger. In the present study,IFN-γ was detected by HLA-DR and ICAM-1. The results showed that IFN-γ was detected by HLA-DR and ICAM-1. On the one hand,in viro, the impact of each change in temperature is discussed in detail,TNF α is discussed in detail, and the development of IIMHC is enhanced.

项目成果

K.Tamaki et al.: "1,25ーdihydroxy vitaminD_3 decreascs the interfersonーγ(IFNーγ)induced HLAーDR expression but not intercellnlan adhesion molecule 1(I(AMー1)on humam keratinocytes" Regional lmmunology. in press. (1991)

K. Tamaki 等人：“1,25-二羟基维生素 D_3 降低人角质形成细胞上的干扰素-γ (IFN-γ) 诱导的 HLA-DR 表达，但不降低细胞间粘附分子 1(I(AM-1))”区域免疫学。出版社（1991）

K.Nakamura and K.Tamaki: "Tumar necrosic factor enhances the interfesonーγーinduced class II MHC antigen expression on murvie keratinocytis in vioo" Arch Dermatol Res. 282. 415-417 (1990)

K.Nakamura 和 K.Tamaki：“肿瘤坏死因子增强了小鼠角化细胞中干扰素-γ 诱导的 II 类 MHC 抗原表达”Arch Dermatol Res. 282. 415-417 (1990)