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耐塩性と塩感受性オオムギのベタイン合成酵素のcDNAクロ-ニング

耐盐和盐敏感大麦甜菜碱合酶的cDNA克隆

基本信息

批准号：
03660079
负责人：
高倍鉄子
金额：
$ 0.96万
依托单位：
Nagoya University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
财政年份：
1991
资助国家：
日本
起止时间：
1991 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

1、大麦のベタインアルデヒド脱水素酵素蛋白質の塩による誘導とストレス解除の効果:ベタインアルデヒド脱水素酵素の抗体を用いて,大麦に塩ストレスを与えると本酵素蛋白質のレベルが上昇し,塩ストレスを解除すると本酵素蛋白質のレベルが下降した。よってベタイン合成酵素の蛋白質レベルが浸透圧ストレスに応答して変動することを確認した。2、塩感受性と耐塩性大麦のベタイン合成酵素の塩による誘導を調べた所,塩感受性大麦の方が応答が顕著であることが判明した。3、塩感受性大麦よりPoly(A)^+RNAを精製し,cDNAを合成した。それをλZaPIIに導入し,cDNAライブラリ-を作製した。ベタインアルデヒド脱水素酵素に対する抗体を用いてスクリ-ニングを行い,ほぼ完全長のcDNA(1.9Kbp)を得た。この核酸の一次講造の決定を行ったところ,ベタインアルデヒド脱水素酵素の補酵素NAD^+の結合部位に特徴的なアミノ配列のあることが確認できた。最近ホウレンソウのベタインアルデヒド脱水素酵素のcDNAの一次構造の報告がアメリカのハンソンのグル-プによって報告されたが,それとアミノ酸配列のレベルで70%の相同性があった。我々は単子葉植物のベタイン合成酵素のcDNAのクロ-ニングを最初に行ったグル-プとなった。今後本酵素遺伝子をベタインを蓄積せず耐塩性の低いイネに導入し,耐塩性イネを創生することを試みる予定である。

1. Effect of induction and release of protein of barley enzyme: When antibody of barley enzyme was used, protein of barley enzyme increased and protein of barley enzyme decreased. The protein metabolism of the enzyme is determined by the reaction time. 2. The induction of enzyme synthesis in susceptible and tolerant barley was regulated, and the recipe of susceptible barley was identified. 3. Sensitive barley Poly(A)^+RNA purification,cDNA synthesis Zapii is introduced into the cDNA library and is controlled by the cDNA library. The complete cDNA(1.9Kbp) was obtained by using the cDNA library to detect antibodies against the enzyme. The determination of the primary production of this nucleic acid is based on the identification of the binding site of the enzyme NAD^+, which is characterized by the presence of the enzyme NAD^+. Recently, a report on the primary structure of the cDNA of the enzyme has been published, and 70% identity has been obtained. The first step in the development of cDNA for the enzyme synthesis of cotyledon plants In the future, the enzyme gene will accumulate, and the resistance will be low.