ヒト伊東細胞のコラーゲン合成に関する研究

人伊藤细胞胶原合成的研究

• 批准号: 03670374
• 负责人: 中野 博
• 金额: $ 1.22万
• 依托单位: Nara Medical University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
• 财政年份: 1991
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1991 至 1992
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-03670374/
• 关键词: 培養伊東細胞; I、III、IV型コラーゲン; 免疫組織化学的染色; mRNAの発現; ヒト; 伊東細胞; I型コラゲン; III型コラゲン; IV型コラゲン; 免疫組織化学染色法; 培養系

既に報告した方法(肝臓32:169-74,1991)に従い、細切したヒト切除肝の組織培養で切片周囲に増生した細胞より、metrizamide溶液の三層比重遠心法を用いヒト伊東細胞を分離した。伊東細胞の同定は光顕、電顕的形態、細胞内ビタミンA含有脂肪滴の存在、培養液中に添加したレチノールの取込で行なった。分離した細胞を3-4代継代した細胞につき、下記の検討を行なった。1、ヒト伊東細胞内コラーゲンの免疫組織学的検索上記培養伊東細胞を固定後、和歌山医大病理学教室・大島章教授より提供を受けたI、III、IV型ヒト単抗体を用いてperoxidase-antiperoxidase法にて細胞内I、III、IV型コラーゲンの局在を検討した。その結果、I、III型コラーゲンは主として核周辺部に網目状、あるいは顆粒状に染色され、一部は細胞質周辺辺縁部に小顆粒が連なる形状で染色された。 一方、IV型コラーゲンはI、III型と同様核周辺部にみられるものの染色性は低かった。しかしI、III型に比し細胞内に広く網目状に染色された。(肝臓33:327-330,1992)2、伊東細胞内I、IIIおよびIV型プロコラーゲンm-RNAの発現佐賀医大内科・堺隆弘教授より提供を受けたヒトI、III、IV型プロコラーゲンcDNAを含むプラスミドを大腸菌に導入し増殖させた後、各プロコラーゲンcDNAを抽出した。得られたcDNAは制限酵素処理後、電気泳動でそのサイズを確認した。一方、培養伊東細胞からRNAを抽出し現在northern blot hybridizationにて各型プロコラーゲンmRNAの発現を確認中である。

Both に report し た method (9-74199-1) routine liver tablets に 従 い, fine cut し た ヒ ト resection of liver tissue culture で の slice weeks 囲 に raised raw し た cells よ り の metrizamide solution, 3 layers proportion far art を with い ヒ ト Mr ITO cell separation を し た. の east cells, and with fixed は 顕, electric light 顕 morphology, cell ビ タ ミ ン containing fat drop の exists, A medium, add し に た レ チ ノ ー ル の take 込 で line な っ た. Isolate the を た cells を for the 3rd and 4th generations of 継 and the に た cells に for the に た. The following is a description of the <s:1> 検 to discuss the を line なった. 1, ヒ ト Mr ITO cell コ ラ ー ゲ ン の immune histological 検 line is written after Mr ITO cell を fixed, wakayama university professor pathology, classroom oshima, chapter よ り provide を by け た type I, III, IV ヒ ト を 単 antibody with い て peroxidase antiperoxidase method - に て cell type I, III, IV コ ラ Youdaoplaceholder0 ゲ を検 the bureau is at を検 to seek た. そ の results, type I and III コ ラ ー ゲ ン は main と し て nuclear 辺 に mesh shape, zhou あ る い は granular に dyeing さ れ, a week は cytoplasm 辺 辺 try of small particles が に な る shape で dyeing さ れ た. One side, type IV コラ コラ ゲ <s:1> <s:1> <s:1> <s:1> <s:1> と type I and type III と are the same. The perinuclear 辺 part にみられる にみられる <s:1> <s:1> <s:1> has a low staining power <s:1> った った. <s:1> に Types I and III に are more stained with に broad く reticular に than in the blast cells された. (liver perforatien 33:32 7-330199-2) 2, the east I and III in the cell お よ び IV プ ロ コ ラ ー ゲ ン m - RNA の 発 saga now an internal medicine, 堺 sumi professor よ り provide を by け た ヒ ト type I, III, IV プ ロ コ ラ ー ゲ ン cDNA contains を む プ ラ ス ミ ド を coliform に import し raised colonization さ せ た after, each プ ロ Youdaoplaceholder0 コラ ゲ ゲ を cDNAを extract た た. After processing the られたcDNA <s:1> limiting enzyme, the electrokinetic activity でそ <s:1> サ ズを ズを ズを was confirmed to be た. On one side, <s:1> らRNAを was extracted from cultured ITO cells, and <s:1> was found in northern blot hybridizationにて. The presence of various types of プロコラ <s:1> ゲ ゲ <s:1> mRNA patches was を and confirmed in である.

项目成果

中川 正則,中林 仁美,高松 正剛,中野 博: "ヒト培養伊東細胞内におけるI,IIIおよびIV型コラ-ゲンの免疫組織学的検索" 肝臓. 33. (1992)

Masanori Nakakawa、Hitomi Nakabayashi、Masatake Takamatsu、Hiroshi Nakano：“在人类培养的 Ito 细胞中进行 I、III 和 IV 型胶原蛋白的免疫组织学研究”33。（1992 年）肝脏。

中川 正則,中林 仁美,高松 正剛,中野 博: "ヒト培養伊東細胞内におけるI,IIIおよびIV型コラーゲンの免疫組織学的検索" 肝臓. 33. 327-330 (1992)

Masanori Nakakawa、Hitomi Nakabayashi、Masatake Takamatsu、Hiroshi Nakano：“在人类培养的 Ito 细胞中进行 I、III 和 IV 型胶原蛋白的免疫组织学研究” 肝脏。33. 327-330 (1992)