腫瘍内浸潤γδT細胞抗原レセプタ-陽性細胞の機能と抗原認識機構の解析

瘤内浸润γδT细胞抗原受体阳性细胞的功能及抗原识别机制分析

基本信息

批准号：
03670484
负责人：
関秀俊
金额：
$ 0.7万
依托单位：
Kanazawa University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
财政年份：
1991
资助国家：
日本
起止时间：
1991 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

腫瘍内浸潤リンパ球(TIL)のほとんどはT細胞抗原レセプタ-(TCR)αβ鎖陽性で自己の主要組織適合性抗原複合体(MHC)拘束性を有し強い自己腫瘍特異的キラ-活性がある。TCRγδ細胞は末梢血中には1〜5%しか存在せず生体内での機能は明らかでなく、腫瘍監視機能に関しても全く不明である。TCRγδ細胞の機能を明らかにするために、生体内で自己の腫瘍で感作されていると考えられるTILに着目し、TIL中のTCRγδ細胞のTCRの構造と機能を検討した。手術で得られた腫瘍組織よりリパ球を分離し、lL2刺激にて自己腫瘍細胞存在下で培養しTCRγδ細胞クロ-ンを樹立した。Wilms腫瘍からはジスルフィド結合を有さない60kDのγ鎖とジスルフィド結合を有する40kDのγ鎖を発現したクロ-ンが得られた。sarcomaやmelanomaから樹立したクロ-ンはジスルフィド結合を有する40kDのγ鎖を発現していた。また正常人末梢血のCD4^-CD8^-細胞からTCRγδ細胞のクロ-ンを25個樹立し表面抗原とTCRの構造を調べた。ジスルフィド結合を有する40kDのγ鎖、ジスルフィド結合を有さない40kDまたは60kDのγ鎖を使用している三種類のTCRを発現するクロ-ンが得られた。さらにこれまでの報告とは異なりジスルフィド結合の有無に関わらずδTCS1抗原陽性クロ-ンが存在した。TCRγδ型TILクロ-ンの細胞傷害活性を検討したところ、すべてのクロ-ンが自己腫瘍に対して傷害活性を示した。しかし一部のクロ-ンはNK感受性細胞や他の腫瘍株に対しても傷害活性がみられ、この研究からは、TCRγδ型TILのMHC拘束性で自己腫瘍特異的な細胞傷害活性を証明できなかった。したがって、TILにおいてはTCRαβT細胞とTCRγδ細胞は異なった様式で腫瘍を認識していると考えられた。

大多数肿瘤内浸润淋巴细胞（TIL）是T细胞抗原受体 - （TCR）αβ链阳性，自我疗程组成性抗原复合物（MHC），并且具有强大的自体肿瘤特异性CHIRA活性。外周血中只有1-5％的TCRγδ细胞存在，其在体内功能尚不清楚，并且肿瘤监测功能是完全未知的。为了阐明TCRγδ细胞的功能，我们专注于被认为是由其自身肿瘤在体内敏感的TIL，并检查了TILS中TCRγδ细胞的结构和功能。从通过手术获得的肿瘤组织中分离出脂肪细胞，并在具有LL2刺激的自体肿瘤细胞的情况下培养以建立TCRγδ细胞克隆。威尔姆斯肿瘤产生的克隆表达了60 kD伽马链和40 kD伽马链，没有二硫键。从肉瘤和黑色素瘤建立的克隆表达了具有二硫键的40 kD伽马链。此外，从正常人外周血中的CD4^-CD8^ - 细胞中建立了25个TCRγδ细胞，并检查了表面抗原和TCR的结构。使用具有二硫键的40 kD伽马链表达三种类型的TCR，并获得了40 kd或60 kD伽马链，没有二硫键。此外，与以前的报道不同，无论是否存在二硫键，都存在ΔTCS1抗原阳性克隆。当研究TCRγδ型TIL克隆的细胞毒性活性时，所有克隆都显示出对自体肿瘤的活性受损。然而，一些克隆还表现出对NK敏感细胞和其他肿瘤系的活性受损，这项研究未能证明TCRγδ-type TIL的MHC限制性自身免疫性细胞毒性活性。因此，人们认为TCRαβT和TCRγδ细胞在TIL中以不同的方式识别。