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増幅DNAを用いた残存白血病細胞検出の基礎的研究

利用扩增DNA检测残留白血病细胞的基础研究

基本信息

批准号：
03670494
负责人：
上田一博
金额：
$ 1.15万
依托单位：
Hiroshima University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
财政年份：
1991
资助国家：
日本
起止时间：
1991 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-03670494/
关键词：
ALL CDRIII Talー1

项目摘要

小児急性リンパ性白血症のうち細胞形態、細胞表面マ-カ-、染色体検査がなされ、経時的にDNAの抽出が行なわれている15症例を対象とした。初診時のDNAについて免疫グルブリン遺伝子(JH,Cκ,Cλ)とT細胞レセプタ-遺伝子(TCRα,TCRβ,TCRγ)の再構成をサザンブロット法で検討した。表面抗原検査よりB細胞起源の症例はすべて免疫グロブリン遺伝子の再構成が認められたため、個々の症例について免疫グロブリン重鎖の可変領域(V_H)と結合領域(J_H)のDNAをプライマ-として白血病細胞特異的CDRIII遺伝子のDNA塩基配列の決定を試みた。しかし、PCRを用いた白血病細胞特異的CDRIII遺伝子の塩基配列の決定はPCRの感度によるものか、かなりの夾雑物のために1例のみCDRIIIの塩基配列が決定出来た。本症例において初診時より保存されたDNAを用いたPCR法での残存白血病細胞の有無を1年の経過で検討した。形態学的、染色体検査では完全寛解を維持しているものの、PCRでは絶えず陽性を示していた。本方法の有用性については今後の臨床的経過との関係を詳細に検討しなければならないが,個々の症例におけるCDRIIIの申基配列の困難さはB細胞系ALLの残存白血病細胞の検出には限界があるものと思われた。一方、T細胞起源のALL6例ではT細胞レセプタ-遺伝子の再構成が5例で認められた。近年、TーALLよりtalー1遺伝子がクロ-ニングされ、小児TーALLでは約25%に再構成がみられる。talー1遺伝子の塩基配列は決定されているので、これをもとにプライマ-の作製を行なった。我々のTーALL症例でもtalー1遺伝子の再構成の認められる症例ではこのプライマ-を用いてPCR法での残存白血病細胞の検出が可能と考え、現在あわせて検討を継続している。

The cell shape, cell surface, chromosome size, and DNA extraction were detected in 15 patients with acute acute leukemia. the results showed that there were 15 cases of acute acute leukemia. In the early stage, DNA was used to immunize JH,C κ (C λ) and T cells (TCR α, TCR β, TCR γ). In the case of surface antigen antigen B cell origin syndrome, the immune immune virus was reorganized into a vaccine, and the immune response of two patients was reconstituted. The reassorable field (Vahd) combined with the field (Junction) of DNA antigens-the CDRIII subsets of leukemias specific to leukemia cells were sequenced to determine the test. The specific CDRIII subsets of leukemic cells were used to determine the sensitivity of CDRIII and PCR to determine the sensitivity of leukemia. the sensitivity of leukemias was determined by CDRIII. In this case, the DNA was preserved at the beginning of the disease. The residual leukemic cells were detected by PCR method. Morphologically, the chromosomes are completely resolved, and the chromosomes are completely maintained, and the PCR genes are expressed sexually. This method can be used to evaluate the efficacy of this method in the future. In the future, the patients in the hospital were treated with CDRIII. In one case, the poor cell line B cell line ALL residual leukemia cell line was used to determine the limit of the disease. On one side, the origin of T cells was found in 6 cases. T cells were subdivided into 5 cases. In recent years, there are about 25% of the total tal and 25% of the total ALL in recent years. The base column of tal 1 sub-column determines the number of rows in which you want to make a decision. We use the method of PCR to detect the possibility of ALL's disease, which can be reorganized into a case of tal's disease.