LCAT欠損症患者の遺伝子解析

LCAT缺乏症患者的基因分析

• 批准号: 03671153
• 负责人: 芳野 原
• 金额: $ 1.28万
• 依托单位: Kobe University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
• 财政年份: 1991
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1991 至 1992
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-03671153/
• 关键词: LCAT; 遺伝子解析; PCR-RFLP; PCR; Ndel digestion

Lecithin cholesterol acyltransferase(LCAT)は血中コレステロールをエステル化する酵素で血中リポ蛋白粒子のレシチンのbeta一位脂肪酸を非エステル型コレステロールの3-OH基に転位する反応を触媒し、肝蔵で合成され血液中に分泌され、HDL粒子と結合する。家族性LCAT欠損症は本酵素を先天的に欠損する疾患であり、罹病期間の延長とともに腎機能が低下し、腎不全となる。極めてまれな疾患で、本邦においても未だ7家系が報告されているに過ぎない。本家系は動脈硬化の・negative risk factorと考えられているHDL-コレステロールの低下とHDL粒子の構造および組成の異常が特徴である。一方、本酵素活性の低下とHDL-コレステロールの低値は冠動脈硬化と深い関わりを持つことが知られている。したがって、本酵素の分子遺伝学的解析を行うことは動脈硬化進展予防に極めて重要な情報を提供することとなる。本酵素欠損症の遺伝子解析の報告はイタリアからの1例のみであった。今回、我々は本邦における本疾患の2家系から3人の血液を入手LCAT geneの解析を行った。初年度には先ず、遺伝子変異の解析を行った。即ち、本患者の白血球よりゲノミックDNAを採取し、次に患者LCAT遺伝子の全エクソン(I〜IV)及び、エクソン/イントロン移行部の各領域をPolymerase chain reaction(PCR)法にて増幅した。さらにPCR一次産物を非対称PCR法にて増幅し、一本鎖変異DNAを得、直接法にて一本鎖変異DNAの塩基配列を決定した。その結果、本2家系にエクソン6の293番目のメチオニンをコードする遺伝子にGからAの変異を見出し、その為イソロイシンへのアミノ酸の置換によりLCAT活性をほとんど欠除する変異体が生じているものと考えられた。

Lecithin cholesterol acyltransferase (LCAT) コレステロールをエステル化するzyme で血リポprotein particles のレシチンのbeta one Fatty acid is a non-reactive fatty acid type 3-OH based 3-OH base reaction catalyst, liver synthesis and secretion in the blood, and HDL particle binding. Familial LCAT deficiency is a disease caused by congenital deficiency of the enzyme, prolongation of the disease period, low renal function, and renal insufficiency. The disease is extremely serious, the report of the 7 family members of the country is not reported, and the disease has passed. This family has arteriosclerosis, negative risk factor, HDL-HDL, low HDL particle structure, and abnormal composition of HDL particles. On the one hand, the activity of this enzyme is low and the HDL-コレステロールのlow value is caused by coronary artery sclerosis. Analysis of the molecular genetics of this enzyme and prevention of the progression of arteriosclerosis are important information provided. This is a report on one case of enzyme deficiency syndrome analysis. This time, I will start with the analysis of the LCAT gene in the blood of 2 families with this disease and 3 people. The first year of the year is the first, and the remaining son is different. The analysis is the line. That is, the white blood cell DNA of this patient was collected, and the patient's LCAT leftover was completely collected.クソン(I~IV) and エクソン/イントロンTransition Department's various fieldsをPolymerase The chain reaction (PCR) method is also amplified. The primary product of PCR is the non-symmetrical PCR method, which is used to increase the amplitude, and the direct method is to determine the base alignment of the different DNA.その results, this 2 family にエクソン6の293 episode のメチオニンをコードする伝子にGからAの変differentを见出し、そのFor the replacement of イソロイシンへのアミノacid, によりLCAT active をほとんど owes to remove する変variant が生じているものと卡えられた.

项目成果

Maeda E.: "Lecithin-cholesterol acyltransferase(LCAT)deficiency With a missense mutation in exon 6 of the LCAT gene." Biochem.Biophys.Res.Commun.178. 460-466 (1991)

Maeda E.：“卵磷脂胆固醇酰基转移酶 (LCAT) 缺陷，LCAT 基因的外显子 6 存在错义突变。”

Eiichi Maeda,Yoshiko Naka,Takashi Matakaki,Maki Sakuma,Yasuo Akanuma,Gen Yoshino,Masato Kasuga: "Lecithinーcholesterol acyltransferase(LCAT)deficiency with a missence mutation in exon6 of the LCAT gene" Biochemical and Biophysical Research Communications.

Eiichi Maeda、Yoshiko Naka、Takashi Matakaki、Maki Sakuma、Yasuo Akanuma、Gen Yoshino、Masato Kasuga：“卵磷脂胆固醇酰基转移酶 (LCAT) 缺乏，LCAT 基因外显子 6 存在错位突变”生物化学和生物物理研究通讯。