Solution structure of the Ras-binding domain of AF6 and its interaction with the Ras-protein

AF6 Ras 结合域的溶液结构及其与 Ras 蛋白的相互作用

• 批准号: 5252292
• 负责人: Professor Dr. Hans Robert Kalbitzer
• 金额: --
• 依托单位: Lehrstuhl für Biophysik
• 依托单位国家: 德国
• 项目类别: Research Grants
• 财政年份: 2000
• 资助国家: 德国
• 起止时间: 1999-12-31 至 2004-12-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://gepris.dfg.de/gepris/projekt/5252292?language=en
• 关键词: Solution; structure; Ras; binding; domain

Das beantragte Projekt beschäftigt sich mit der Strukturaufklärung der Ras-bindenden Domäne von AF6, einem Effektor von Ras, der wahrscheinlich eine wichtige Rolle bei der Steuerung der Zell-Zell-Interaktion spielt. Im Gegensatz zu anderen Ras-Effektoren scheint AF6 keine eigene enzymatische Aktivität zu haben. Die Minimaldomäne für effektive Bindung an Ras ist mit 142 Aminosäuren deutlich größer als sie anderen Rasbindungsdomänen mit bekannter Struktur und läßt daher neue Strukturmotive erwarten. Die dreidimensionale Struktur der Ras-bindenden Domäne von AF6 soll mit multidimensionalen heteronuclearen NMRMethoden am isotopenangereicherten Protein aufgeklärt werden. Anschließend soll die Interaktion mit Ras mit NMR-Methoden charakterisiert werden. Für die darauffolgende Strukturbestimmung im Komplex mit Ras soll das Protein mit der Intein-Methode partiell mit den Isotopen 2H, 15N und 13C angereichert werden, um die Zuordnungsproblematik im hochmolekularen Komplex zu erleichtern und die Strukturbestimmung zu beschleunigen.

这一工程需要AF 6的Ras-bindenden Domäne的结构，Ras的效应，以及Zell-Zell-Interaktion spielt的控制作用。在建立和建立Ras-Effektoren时，AF 6没有自身的酶活性。Die Minimaldomäne für effektive Bindung an Ras ist mit 142 Aminosäuren deutlich größer als sie anderen Rasbindungsdomänen mit bekannter Struktur und läßt daher neue Strukturmotive erwarten. AF 6的三维结构结合区可采用多维异核NMR方法检测韦尔登。采用具有韦尔登特征的Ras方法进行相互作用。用蛋白质溶液和同位素韦尔登、13碳组成的内标法测定复合物的结构参数，可以解决高分子复合物的结构问题，使复合物的结构参数更加一致。