Ribonuklease P - Untersuchungen zum Spaltmechanismus, zur Substrat- und Produkt-Bindung sowie zur Identifizierung und Charakterisierung wichtiger funktioneller Gruppen der katalytischen RNA-Untereinheit bakterieller Enzyme

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Die ubiquitär vorkommende Ribonuklease P (RNase P) ist für die endonukeolytische 5'-Endoprozessierung von tRNAs verantwortlich. Die bakterielle RNase P ist das bisher einzig bekannte Ribonukleoprotein-Enzym, dessen RNA-Untereinheit allein Träger der katalytischen Funktion ist. Die geplanten Untersuchungen umfassen: (a) die Bestimmung von Substraterkennungsstrategien durch phylogenetisch verschiedene RNase P-Enzyme, (b) die Identifizierung von Bereichen und funketionellen Gruppen der bakteriellen RNase P RNA, der Proteinkomponente und des Substrats, die miteinander wechselwirken, (c) kinetisch-thermodynamische Untersuchungen zur tRNA-NCCA-Interaktion bakterieller RNase P RNAs des Strukturtyps B, (d) die Charakterisierung des Spaltmechanismus (Rolle von Metallionen und funktionellen Gruppen) ausgewählter bakterieller und eukaryontischer RNase P-Enzyme mittels singulär und doppelt modifizierter Substrate.