Selektion von RNA-Aptameren gegen Schlüsselkomponenten bei der Endotoxin-vermittelten Sepsis
针对内毒素介导的脓毒症关键成分的RNA适体的选择
基本信息
- 批准号:5252422
- 负责人:
- 金额:--
- 依托单位:
- 依托单位国家:德国
- 项目类别:Research Grants
- 财政年份:2000
- 资助国家:德国
- 起止时间:1999-12-31 至 2002-12-31
- 项目状态:已结题
- 来源:
- 关键词:
项目摘要
Lipopolysaccharid (LPS) löst in höheren Organismen eine Vielzahl von pathophysiologischen Wirkungen aus, welche als Manifestation der bakteriellen Sepsis bekannt sind. Weder das Problem der rechtzeitigen Diagnose noch der Therapie ist medizinisch gelöst. Die hochkonservierte Lipoid A-Komponente repräsentiert das toxische Prinzip der LPS. Versuche zur Entwicklung therapeutisch wirksamer, Lipoid A-spezifischer Antikörper sind erfolglos geblieben. Es besteht daher ein dringender Bedarf an neuen Ansätzen nicht nur zur Therapie der Sepsis sondern auch zur Erforschung ihrer molekularen Grundlagen. In vitro-Selektionsverfahren ermöglichen die Isolierung von RNAs, die hochaffin und spezifisch an Zielmoleküle binden (sogenannte RNA-Aptamere) und Antikörpern in verschiedenen Aspekten überlegen sind. Die Methodik soll zunächst zur Selektion von RNA-Aptameren genutzt werden, die spezifisch an folgende Komponenten binden: (1) das Lipoid A, sowohl in isolierter Form als auch in Verbindungen mit Zuckerresten der konservierten Kernregion; (2) die extrazellulären Domänen der Toll-ähnlichen Rezeptoren TLR2 und TLR4, die eine Schlüsselfunktion im Kontext der LPS-induzierten Signalkaskade besitzen. Die selektierten Aptamere sollen strukturell und funktionell charakterisiert, auf ihre diagnostische und therapeutische Eignung untersucht sowie als molekulare Werkzeuge in der Sepsis-Forschung eingesetzt werden.
脂多糖(LPS)在人体内的病理生理学表现是多种多样的,也是细菌性脓毒症的表现。这是一个治疗学上的再诊断问题。高浓度Lipoid A-Komponente代表LPS的毒性原理。Versuche zur Entwicklung therapeutisch planksamer,Lipoid A-spezifischer Antikörper sind erfolglos geblieben.最好的治疗方法是用新的抗感染药物治疗败血症。在体外,选择性分离RNA、特异性结合Zielmoleküle binden(sogenannte RNA-Aptamere)和Antikörpern,以确保预期的结果。韦尔登选择RNA修饰基因的方法,其特征在于:(1)Lipoid A,以隔离形式存在于含有保守核心区的连接器中;(2)额外的Toll-ahnlichen Rezeptoren TLR 2和TLR 4,在LPS诱导的信号灯的连接器中有一个Schlüsselfunction。选择性适体的结构和功能特性,在脓毒症的诊断和治疗中具有重要的分子作用,可用于韦尔登的研究。
项目成果
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