真核・原核両細胞で機能するCandida酵母のICLプロモーターの基礎解析

在真核和原核细胞中发挥作用的念珠菌酵母 ICL 启动子的基本分析

• 批准号: 05856013
• 负责人: 跡見 晴幸
• 金额: $ 0.58万
• 依托单位: Kyoto University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1993
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1993 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-05856013/
• 关键词: イソクエン酸リアーゼ; 転写調節; Candida; プロモーター; 進化

真核細胞であるSaccharomyces cerevisiaeと原核細胞であるEscherichia coilの双方で酢酸を炭素源とした場合に遺伝子の誘導発現を促す酵母Candida tropicalisのイソクエン酸リアーゼ(ICL)遺伝子の上流領域の機能解析を行った結果得られた知見を以下に示す。1.Dideoxy法を用いてICL遺伝子の開始コドンより上流の領域1530bpの全塩基配列を決定した。2.PCR法などを用いてICLプロモーターの様々な領域を欠失させたものを作製し、それぞれをS.cerevisiae、E.coli内に導入した。導入した各株をグルコースおよび酢酸を炭素源として培養し、ICL遺伝子の発現量を調べた。この結果、ICL遺伝子上流領域の中にS.cerevisiae内で機能するプロモーター(proA)とE.coli内で機能するプロモーター(proB)がそれぞれ独立して存在していることがわかった。それぞれのプロモーターの塩基配列を調べると、proAはS.cerevisiaeのグルコースレプレッションに関わりのあるMIG1タンパク質のDNA結合領域と高い相同性を示し、probはE.coli内のICL遺伝子aceBAKの調節にかかわりのあるlclRタンパク質のDNA結合部位と高い相同性を示した。今までに得られた結果はきわめて興味深く、今後、proA、proBに実際に結合するタンパク質を同定するなど、さらなる解析によりICL遺伝子の転写調節についてだけでなく、原核細胞から真核細胞への転写調節機構の進化についての知見が得られる可能性は高いと言える。

Eukaryotic Saccharomyces cerevisiae, prokaryotic, Escherichia coil, and both sides of the cell, the source of oxalic acid, the source of carbon, the combination of sorbic acid and carbon sources, has been shown to promote the growth of yeast Candida tropicalis. The upstream domain of ICL has been able to analyze the results of high-level field analysis, and the following information has been obtained. The 1.Dideoxy method starts with a simple ICL sub-column to determine the overall base of the 1530bp column in the upstream field. In the 2.PCR method, there is a lack of information in the field of information. In the 2.PCR method, there is a lack of information in the field, such as the S.cerevisiae, the E.coli, and so on. In each plant

项目成果

Haruyuki Atomi: "Charaterization of a Dicarboxylic acid-Praducing Mutant of the Yeast Candida tropicalis" Journal of Fermentation and Bioengiueering. 77. 205-207 (1994)

Haruyuki Atomi：“热带酵母念珠菌产二羧酸突变体的表征”发酵与生物工程杂志。

Hiroshi Kinoshita: "Characterization of the catalase of the n-alkaue-utilizing yeast Candida tropicalis functionally expressed in Saccharomyees cerevisiae." Applied Microbiolgy and Bi〓technology. 40. 682-686 (1994)

Hiroshi Kinoshita：“在酿酒酵母中功能性表达的正碱性利用酵母假丝酵母的过氧化氢酶的特性。”应用微生物学和生物技术（1994）。

Haruyuki Atomi: "Presence of carnitine acetyltrausferase in peroxisomes and in mitochondria of oleic acid-grown Saccharomyces cerevisiae" FEMS MICROBIOLOGY LETTERS. 112. 31-34 (1993)

Haruyuki Atomi：“油酸生长的酿酒酵母的过氧化物酶体和线粒体中存在肉碱乙酰转移酶”FEMS 微生物学快报。