权益分类	功能权益	普通用户	{{item.name}}会员
{{category.name}}	{{benefitItem.name}}

ヒト神経芽腫の分化誘導療法の基礎的研究

人神经母细胞瘤分化诱导治疗的基础研究

基本信息

批准号：
05152110
负责人：
杉本徹
金额：
$ 1.28万
依托单位：
宮崎医科大学
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Cancer Research
财政年份：
1993
资助国家：
日本
起止时间：
1993 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-05152110/
关键词：
ヒト神経芽腫細胞分化分化誘導療法

项目摘要

ヒト神経芽腫(Neuroblastoma 以下NB)は、神経冠由来の悪性腫瘍で、小児固形悪性腫瘍の中で最も頻度が高い。また進行NB患児の予後は現在なお不良である。我々は、現在まで種々の分化誘導剤を用いて、NBの多分化能を検討、NBの神経細胞、Schwann細胞あるいは平滑筋細胞への分化を明らかにしてきた。本研究は、化学療法と外科手術後の残存腫瘍の根絶を分化誘導療法で行ない、進行性 NBの予後改善をはかることを最終目的とする。このため【.encircled1.】retinoidによるNBのin vitroでの細胞分化誘導の機序を明らかにし、また【.encircled2.】ヌード・マウスを用いてin vivoでの分化誘導療法の可能性を検討した。1.分化誘導剤の選択:NBの神経細胞への分化誘導を、種々の分化誘導剤を用いて検討した。そのうち合成 retinoid(E5166)は、in vitroでのNBの神経細胞への分化誘導能が最も強く、また副作用もretinoic acidの1/10と少なく、臨床応用が最も期待される分化誘導剤であった。このため以下の研究ではE5166を用いた。2.ヌード・マウスでの分化誘導療法:NB細胞株KP-N-RTを20×10^6個宛ヌード・マウスに移植すると、約90日で腫瘍が触知可能となる。そこでNB移植翌日(Day 1)、腫瘍触知(Day 90)あるいは腫瘍5mm大(Day 120)の時期より、E5166を経口投与した。そしてE5166の腫瘍の増殖に及ぼす影響を経日的に観察した。その結果NB移植翌日(Day 1)よりE5166を投与した群で有意に腫瘍増殖抑制がみられた。また腫瘍増殖抑制がみられたE5166投与ヌード・マウス群のNB移植腫瘍を用いて、形態学的変化を検討した。その結果NB細胞の神経細胞への分化と間質の増殖(Schwann細胞への分化と考えられる)が見られた。3.retinoidによる神経細胞への分化の機序:retinoidによるNBの分化誘導の機序はよく分かっていない。そこでretinoic acid受容体alpha,betaとgammaのcDNAを用いて、NBの神経細胞への分化能とretinoic acid受容体との関係を検討した。その結果E5166処理により、retinoic acid受容体(alphaとbeta)のmRNA発現が増加した。4.その他のretinoidによる分化誘導:E5166以外の合成retinoid(Am80,Ch55,Am580,Re80)(東大首藤教授より供与)についても、NBの分化誘導能を検討した。その結果Am80,Ch55とRe80にNB細胞の神経細胞への分化能があることが判明した。以上retinoidによるNB細胞の神経細胞への分化が、in vitroとin vivoで証明され、ヒトNB患児での分化誘導療法の可能性が示された。

Neuroblastoma (NB) is the most frequent type of Neuroblastoma, and the most frequent type of small solid neuroblastoma is the most frequent type of neuroblastoma. The next step is to get rid of the bad news. The differentiation of NB-cells and Schwann cells was studied by using the method of differentiation induction. This study aims to investigate the effects of chemotherapy and differentiation induction therapy on the residual tumors after surgery.このため【.encircled1.】The mechanism of induction of cell differentiation in vitro of retinoid cells is clearly described. The possibility of differentiation induction therapy in vivo is discussed. 1. Selection of differentiation inducing agent: The differentiation inducing agent of NB's nerve cells and the differentiation inducing agent of seed are discussed in the middle. Retinoid synthesis (E5166) is the most potent in vitro for differentiation induction of neurocytes, and its side effects are 1/10 of those of retinoic acid, which is the most desirable in clinical use. E5166 is used in the following research. 2. Differentiation induction therapy:NB cell line KP-N-RT 20×10^6 cells were transplanted into the tumor at about 90 days. The day after NB transplantation (Day 1), tumor detection (Day 90), tumor size 5mm (Day 120), E5166, tumor injection E5166's growth and impact on growth E5166 was cast on Day 1 of NB transplantation, and the growth inhibition was intentional. E5166 and E5166 were used to study the morphological changes of tumor cells. As a result, the differentiation of neurocytes in NB cells and the proliferation of stroma (Schwann cell differentiation) were observed. 3. The mechanism of retinoid neurocyte differentiation: The mechanism of retinoid neurocyte differentiation is divided into two parts. To explore the relationship between the cDNA of retinoic acid receptor alpha,beta and gamma, and the differentiation ability of NB and retinoic acid receptor. As a result of E5166 treatment, mRNA expression of retinoic acid receptor (alpha and beta) increased. 4. Differentiation induction of retinoids: synthetic retinoids (Am80,Ch55,Am580,Re80) other than E5166 (provided by Professor Toda Suto) The results showed that Am80,Ch55 and Re80 could differentiate NB cells into neurocytes. The above results demonstrate the possibility of differentiation induction therapy for retinoid cells and neurocytes in vitro.