禾本科植物の種子カルス誘導とそれに関する生理学的研究

种子愈伤组织诱导及相关生理研究

• 批准号: 05760010
• 负责人: 藤野 介延
• 金额: $ 0.58万
• 依托单位: Hokkaido University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1993
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1993 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-05760010/
• 关键词: オオムギ; イネ; トランジェントアッセイ; エレクトロポレーション

禾本科のうち稲では既にプロトプラストからの個体再生系が確立されている。そこで稲と大麦のプロトプラストにおけるエレクトロポレーションの条件を検討した。また大豆の振盪培養細胞ならびに馬鈴薯の葉肉プロトプラストとも比較した。振盪培養細胞からプロトプラストを調整しpBI221(35Sプロモーター+GUS)のエレクトロポレーションを行った。処理後3日目のプロトプラストのグロクローニダーゼの活性をMUGによる蛍光値により検討した。稲の場合、GUS活性は電気容量250muF時で電圧が900V/cmのときに最も高い活性を示した。また大麦の場合活性の最大値は120V/cmで稲・大豆の振盪培養細胞に比較し高い値を示した。供試するDNAの精製方法によっても影響を受けた。塩化セシウムによる精製とQIAGEN(QIAGEN社)により精製を比較した場合QIAGENによるほうが1.5倍近く活性が高くなった。しかしながら35Sプロモーターによる発現はトランジェントアッセイの場合においても双子葉植物と比較してかなり低かった。大麦の誘導組織の違いによるカルスについて比較検討した。種子の芽生えの生長点からカルス誘導を行いそれらの振盪培養による維持・増殖を行なった。これらのカルスと未熟配胚より誘導したカルスのタンパク質の相違をSDS-PAGEにより検討した。これらのカルスは両者とも品種ディサより誘導した。培養期間は1年以上経過しており安定した細胞系統を使用した。幾つかのタンパク(主に90kD,40kD,33kD,19kD,17kD)において差が見られた。これが誘導組織による継代培養中の変異か不明であるが今後これらの系統を比較することで形態形成能の違いについて検討を加える必要がある。

The individual regeneration system of Gramineae was established. The conditions for the selection of candidates for the post of Chief Executive Officer are discussed. Comparison of soybean and potato mesophyll in shake culture The shaking culture cells were adjusted to pBI221(35S) and the shaking culture cells were adjusted to pBI221(35S). 3 days after treatment, the activity of MUG was measured by UV. The highest GUS activity was achieved at a voltage of 900V/cm when the capacitance was 250muF. The maximum activity of barley was 120V/cm. The highest activity of soybean was 120V/cm. The method of DNA purification was studied. QIAGEN(QIAGEN Corporation) has a high activity of 1.5 times in comparison with QIAGEN. In the case of dicotyledonous plants, the occurrence of dicotyledonous plants is relatively low. Barley induced tissue in the middle of the study Seed germination, growth point, induction, oscillation culture, maintenance and propagation The results of SDS-PAGE analysis showed that the protein content of the protein was higher than that of the protein.これらのカルスは両者とも品种ディサより诱导した。The culture period is more than 1 year. A few days later, he was arrested (90kD,40kD,33kD,19kD,17kD). The differences in induction tissue culture are unknown, and the differences in morphogenesis are necessary.