禾本科植物の種子カルスに関する生理学的研究

颈科植物种子愈伤组织的生理研究

• 批准号: 08760009
• 负责人: 藤野 介延
• 金额: $ 0.58万
• 依托单位: Hokkaido University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1996
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1996 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-08760009/
• 关键词: Oryza sativa; ABA; 形態形成; イネ; カルス; ペルオキシレドキシン

稲カルスにおいて形態形成を誘導する前にABA処理やストレスを与えることにより再分化率が向上する。そこでABA処理を行ったカルスよりタンパクを抽出しSDS-PAGEを行ったところ無処理区には存在しないタンパクがいくつかみられた。このうち24.5kDのタンパクを精製し抗体を作成した。このタンパクのアミノ酸シークエンス等を行なったところオオムギの種子の成熟過程に出現するタンパク質と高い相同性が見られた。このアミノ酸配列からプライマーを合成しRT-PCRを行い、増幅したDNA断片をプローブとしライブラリーよりcDNAをスクリーニングした。このcDNAのシークエンスを行い、塩基配列を決定し(D63917)RPer-1とした。RPer-1は酵母や人など生物に広く存在するTSA(Thiol-specific Antioxidant)又はペルオキシレドキシンと高い相同性を示した。RPer-1を大腸菌で発現させたところイネの24.5kDの抗体と反応し、またTSA活性を示した。RPer-1はイネの培養カルスにおいて、恒常的にわずかながら発現しているが、3mg/1 ABA処理に対し1時間以内に強く発現し、また乾燥処理においてはABAよりもはるかに強く発現した。以上のように本研究では、ABAにより誘導される蛋白質のアミノ酸配列よりそれをコードする遺伝子の塩基配列を決定し、またその発現を研究した。今後はこの遺伝子が形態形成にどのように関与しているか検討し、これにより稲や大麦などの禾本科の組織培養における種子からのカルス誘導や効率の高い形態形成系の確率を図るものである。

Before the formation of ABA, the rate of redifferentiation increased. The ABA treatment was carried out in SDS-PAGE and the untreated area was found in SDS-PAGE. 24.5kD and 24.5kD. The seed maturity process of the seed is characterized by high identity. The sequence of DNA fragments was amplified by RT-PCR. The cDNA sequence is determined by the sequence and base alignment (D63917)RPer-1. RPer-1 is a Thiol-specific Antioxidant (TSA) that exists in yeast and human beings. RPer-1 was found in E. coli and its 24.5 kD antibody and TSA activity were shown. RPer-1 was found in culture medium, constant medium, 3mg/1 ABA medium and dry medium. In this study, ABA induced protein expression was determined and its expression was studied. In the future, the relationship between the morphogenesis of the seed and the tissue culture of the grass family will be discussed.