カワラタケ菌体外酵素による縮合型タンニンモデル化合物の分子変性

云芝体外酶对缩合单宁模型化合物的分子变性

• 批准号: 05760137
• 负责人: 光永 徹
• 金额: $ 0.58万
• 依托单位: Mie University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1993
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1993 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-05760137/
• 关键词: 縮合型タンニン; (+)-catechin; profisetinidin dimer; カワラタケ; 核交換反応

縮合型タンニンのカワラタケ菌体外粗酵素による変換においてタンニンは酵素タンパクと強固に結合し、その変換挙動を考察することが出来なかった。そこで、タンパク沈澱能の低いタンニンのモデル化合物である(+)-catechin及びprofisetinidin dimerを用いてその変換挙動を追跡した。1.(+)-catechinの変換挙動(+)-catechinは酵素処理において黄色化合物であるY-2及びY-3に変換されることが認められた。これらの両物質ともMassスペクトルから(+)-catechinの2量体に相当し、アセチル化物の^1H-NMRスペクトルからA環とB環が直接結合した構造であった。また、IRスペクトルからは共役カルボニル基の存在が示唆され、芳香環が酸化されてキノン構造をした(+)-catechinの2量体であると推定した。これらの物質は酵素反応時間が経過するに従い、より分子量の大きいポリマーへ重合されることが認められた。2.核交換反応による(+)-catechin重合物の解析当研究室で開発された核交換反応とは、BF_3存在下で過剰のフェノールと縮合型タンニンを反応すると、A環とB環を構成しているフェノール核が定量的に遊離し、タンニンの核組成を知る手法である。そこで本手法を用いて(+)-catechinの酵素処理による重合物の解析を行ったところ、処理時間の経過に伴いA環から遊離されるフロログルシノールとB環からのカテコールが共に減少することから、この重合反応はA環とB環の酸化カップリングにより成長するものであり、Y-2及びY-3はその過程の中間物質であることが予想された。3.profisetinidin dimerの変換挙動フラバノイド間結合を持つモデル化合物のprofisetinidin dimerの場合は、反応混合物のGPCによると反応初期に低分子化が著しく、その後経時的に高分子化が進行した。以上の結果から、縮合型タンニンはカワラタケ菌体外粗酵素中の恐らくラッカーゼによりフラバノイド間結合の切断及びA環とB環の酸化カップリングにより解重合と重合が競争的に起こることが予想された。

Condensation type of enzyme in vitro, enzyme in vitro The chemical composition of the compound can be traced by the chemical composition of (+)-catechin and profisetinidin dimer. 1. (+)-catechin and enzyme treatment for yellow compounds Y-2 and Y-3 1H-NMR spectra of the two components of the compound, Mass and (+)-catenin, are directly bound to the A ring and B ring. The existence of a radical in an aromatic ring is indicated by the presence of a radical in an aromatic ring and the presence of a radical in an aromatic ring. The enzyme reaction time of the substance is determined by the molecular weight of the substance. 2. The analysis of nuclear exchange reaction (+)-catenin complexes is carried out in the laboratory. In the presence of BF_3, the nuclear exchange reaction (+)-catenin complexes (+)-catenin complexes)-catenin complexes (+ This method uses the enzyme treatment of the middle (+)-catenin to resolve the coincidence substance, and the treatment time is long, accompanied by the dissociation of the A ring, the acidification of the B ring, and the reduction of the coincidence substance. 3. In the case of profisetinidin dimer, reaction mixture is converted to low molecular weight at the initial stage of reaction, and polymerization is carried out at the later stage. The above results show that the condensation type of the enzyme in vitro can be used to cut off the binding between the A ring and the B ring, and the recombination type of the enzyme can be used to start the competition.

项目成果

Mitsunaga、T.: "The Chemical Structure and Stereochemistry of Phenol Adduct Compound" 木材学会誌. 40. 100-106 (1994)

Mitsunaga, T.：“苯酚加合物的化学结构和立体化学”日本木材学会杂志 40. 100-106 (1994)。