Applying the activation of ubiquitination and proteasome-mediated degradation mechanism by catechin for oral cancer treatment

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In vivoの実験として，口腔扁平上皮癌細胞株のマウス腫瘍移植モデルに対して，カテキンの一種であるEpigallocattechin -3-gallate: EGCGの腫瘍増殖抑制効果を再度検討した．腫瘍の大きさが不安定であった点に対して，鎮静を行った上で，皮下に口腔扁平上皮癌の細胞株であるHSC-3をマトリジェルと混和し，ヌードマウスの背部に移植し(100万個)，コントロール群とEGCG投与群に分けた．鎮静をすることにより，マウスが動かず腫瘍細胞の移植が安定して実施することが可能であった．EGCGは腹腔内への投与経路を選択し，週2回腫瘍の大きさとマウスの体重を測定し，1か月後にマウスから癌組織を取り出し，4% PFAで固定後，パラフィ ン切片を作製した．EGCGを1.5mg/bodyを週2回で腹腔内投与した場合には，腫瘍体積の評価において腫瘍細胞の増殖は抑制されていた．また，増殖の評価としてKi67による免疫染色を行ったところその増殖は抑制されていた．今後は，血管新生について血管内皮細胞のCD31の免疫染色を行うと伴に，血管内皮増殖因子受容体の発現状態について検討する予定である．In vitroの実験として，HSC3細胞株(ヒト舌扁平上皮癌)とHSC4細胞株(ヒト舌癌)に対する EGCGの作用を細胞活性試験(MTS assay)で評価した．いずれも濃度依存的に細胞増殖を抑制した．今後，VEGFの発現に対する影響をmRNAとタンパク発現レベルで評価を行う予定である．