塊根貯蔵タンパク質遺伝子の糖類による発現誘導に関わるシス制御配列

参与糖诱导块茎贮藏蛋白基因表达的顺式调控序列

• 批准号: 05760257
• 负责人: 森上 敦
• 金额: $ 0.58万
• 依托单位: Nagoya University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1993
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1993 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-05760257/
• 关键词: ショ糖誘導; シス配列

<形質転換タバコを用いたショ糖誘導に関わるシス配列の解析>サツマイモ塊根主要タンパク質スポラミンが、高濃度のショ糖処理により元来このタンパク質がほとんど存在しない葉や葉柄に大量に誘導される機構を明らかにすることを目的として、この遺伝子の5'転写制御領域とレポーター遺伝子の融合遺伝子を導入したタバコを作製したところ、サツマイモで見られるのと同様なショ糖による誘導が形質転換タバコ葉で見られた。そこで転写制御領域に様々な欠失を持つ融合遺伝子を作製し解析を行った所、このショ糖誘導には領域A及びBと呼ばれる2つの領域が必須であることが明らかになった。領域A及びBの両方を含む断片とショ糖誘導性を示さないカリフラワーモザイクウィルスの35SプロモーターのTATA配列領域を含む断片(-89プロモーター)とを連結した融合遺伝子もショ糖誘導性を調べた。そこで領域Aのみと/89プロモーターとの融合遺伝子を作製しその発現を調べたところ、領域A・領域Bの両方を含む場合に比較してかなり低いレベルであるがショ糖誘導性が見られることが明らかになった。このことから領域Aをショ糖誘導のスイッチの役割を果たすシス制御配列と判断した。領域Aについてさらに解析を進めるために、領域A内の配列に2塩基ずつの塩基置換したいくつかの融合遺伝子を作製し調べた結果、^<5'>TGGACGG^<3'>がショ糖誘導性に重要であることが判明した。この配列もしくは類似配列はスポラミン同様ショ糖誘導されるサツマイモやシロイヌナズナのbeta-アミラーゼ遺伝子の転写制御領域にも保存されており、植物種を越えてショ糖による強調的な発現誘導に関わる配列であると考えられる。<形質転換サツマイモを用いたスポラミン遺伝子の発現制御の解析>スポラミンの転写制御領域とレポーター遺伝子の融合遺伝子をAgrobacterium rhizogenesを用いて導入したサツマイモ形質転換体の作製は非常に時間がかかるため、現在やっと再生固体ができ始めたところであり、近々その遺伝子発現に関する解析を行う予定である。

<Analysis of morphological change of タバコを using いたショsugar-induced に关わるシス arrangement> サツマイモtuber root mainly タンパク性スポラミンが、高濃度のショ糖処理により元来このタンパク質がほとんど存在しない葉や葉柄に大量に誘導される機構を明らかにすることをpurpose として, この缝子の5'転书controlled domain とレポーター缝子のfusion 缝子を Import したタSame as バコをしたところ、サツマイモで见られるのと様なショsugar による induced がmorphological change タバコ叶で见られた.そこで転WRITING CONTROL FIELDS に様々な owed loss をhold つ fusion legacy 伝子 を 成し ANALYSIS を行った所、このショsugar-induced には区A and びBとHUばれる2つの区がmust であることが明らかになった. Fields A and びBの両方をcontaining fragments of とショsugar-induced を Showing さないカリフラワーモザイクウィルスの35S プロモータThe ーのTATA arrangement field contains the fragment (-89プロモーター) and the fusion link した もショsugar-induced を tune べた.そこで区Aのみと/89プロモーターとのfusion 缝子をproduced しその発成を动べたところ、Field A·Field Bの両square をcontaining む occasion してかなりlow いレベルであるがショsugar-induced が见られることが明らかになった. The field of このことからAをショsugar-induced のスイッチのServant Cut を Fruit たすシスcontrol the arrangement とJudgment した. Domain A's analysis and analysis, Domain A's alignment and 2-base replacement, fusion legacy The results of the child's production and adjustment, ^<5'>TGGACGG^<3'>がショsugar-induced にImportant and clear であることが.この配arrayもしくはsimilar arrangement はスポラミン Same as 様ショsugar-inducedされるサツマイモやシロイヌナズナのbeta-アミラーゼ伝The child's writing controls the field of control and preserves it, and the plant species' えてショsugar and による emphasize the な発 appear and induce the に关わる 配行 であると卡えられる. <Analysis of changing the shape and substance of the サツマイモを to the いたスポラミン 缝子の発成窮> スポラミンAgrobacterium rhizogenes い て import し た サ ツ マ イ モ morphological change body の production は VERY に time が か か る た め, now In the やっとregeneration solid ができ开めたところであり, the near 々その伝子発appears に关するanalytic を行う下注である.